质谱学报
質譜學報
질보학보
2014年
5期
427-437
,共11页
张爱红%林虹君%黄顺祥%周学志
張愛紅%林虹君%黃順祥%週學誌
장애홍%림홍군%황순상%주학지
稀土金属%质量标签%基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
稀土金屬%質量標籤%基質輔助激光解吸電離-飛行時間質譜(MALDI-TOF MS)
희토금속%질량표첨%기질보조격광해흡전리-비행시간질보(MALDI-TOF MS)
rare earth metal%protein quantification%matrix-assisted laser desorption-ionization-time of flight mass spectrometry(MALDI-TOF MS)
稀土金属元素因其与双功能试剂的螯合效率高、对肽段的反相色谱行为和质谱的离子化效率影响小、检测背景低,以及过量的金属离子在检测时不会产生干扰等优点,近年来在生物标记结合质谱定量分析研究领域引起了关注.选取稀土金属中单同位素铽(Tb)、钇(Y)、铥(Tm)、钬(Ho)和镥(Lu)5种元素,通过双功能试剂二乙三胺五乙酸双酸酐(DTPA双酸酐)对合成肽段及蛋白质酶切产物标记的过程进行研究,包括对标记条件进行优化,对该质量标签的色谱行为和共洗脱、标记稳定性、离子交换、动态范围、质谱检测限等现象进行考察.结果表明:铥和钬两元素结合效率最高,分别达到了92.5％和89.9％;稳定性考察结果表明,质量标签在4℃下放置一周仍可检测到95％,若将标记好的标签用于定量研究,则放置时间不能超过两周;多金属标记质量标签可以共洗脱;两种金属浓度差不超过6倍时,由离子抑制带来的影响较小;离子交换结果表明,只有很少部分发生了离子交换,对标记实验没有影响.
稀土金屬元素因其與雙功能試劑的螯閤效率高、對肽段的反相色譜行為和質譜的離子化效率影響小、檢測揹景低,以及過量的金屬離子在檢測時不會產生榦擾等優點,近年來在生物標記結閤質譜定量分析研究領域引起瞭關註.選取稀土金屬中單同位素鋱(Tb)、釔(Y)、銩(Tm)、鈥(Ho)和镥(Lu)5種元素,通過雙功能試劑二乙三胺五乙痠雙痠酐(DTPA雙痠酐)對閤成肽段及蛋白質酶切產物標記的過程進行研究,包括對標記條件進行優化,對該質量標籤的色譜行為和共洗脫、標記穩定性、離子交換、動態範圍、質譜檢測限等現象進行攷察.結果錶明:銩和鈥兩元素結閤效率最高,分彆達到瞭92.5％和89.9％;穩定性攷察結果錶明,質量標籤在4℃下放置一週仍可檢測到95％,若將標記好的標籤用于定量研究,則放置時間不能超過兩週;多金屬標記質量標籤可以共洗脫;兩種金屬濃度差不超過6倍時,由離子抑製帶來的影響較小;離子交換結果錶明,隻有很少部分髮生瞭離子交換,對標記實驗沒有影響.
희토금속원소인기여쌍공능시제적오합효솔고、대태단적반상색보행위화질보적리자화효솔영향소、검측배경저,이급과량적금속리자재검측시불회산생간우등우점,근년래재생물표기결합질보정량분석연구영역인기료관주.선취희토금속중단동위소특(Tb)、을(Y)、주(Tm)、화(Ho)화노(Lu)5충원소,통과쌍공능시제이을삼알오을산쌍산항(DTPA쌍산항)대합성태단급단백질매절산물표기적과정진행연구,포괄대표기조건진행우화,대해질량표첨적색보행위화공세탈、표기은정성、리자교환、동태범위、질보검측한등현상진행고찰.결과표명:주화화량원소결합효솔최고,분별체도료92.5％화89.9％;은정성고찰결과표명,질량표첨재4℃하방치일주잉가검측도95％,약장표기호적표첨용우정량연구,칙방치시간불능초과량주;다금속표기질량표첨가이공세탈;량충금속농도차불초과6배시,유리자억제대래적영향교소;리자교환결과표명,지유흔소부분발생료리자교환,대표기실험몰유영향.
