湖北医药学院学报
湖北醫藥學院學報
호북의약학원학보
JOURNAL OF HUBAI UNIVERSITY OF MEDICINE
2012年
4期
285-291,封3
,共8页
张蕾%董小伟%郭凌郧%孔霞%郑飞%杨建业%唐俊明%王家宁
張蕾%董小偉%郭凌鄖%孔霞%鄭飛%楊建業%唐俊明%王傢寧
장뢰%동소위%곽릉운%공하%정비%양건업%당준명%왕가저
PEP-1肽%过氧化氢酶%骨髓间充质干细胞%氧化应激%细胞凋亡%线粒体膜电位
PEP-1肽%過氧化氫酶%骨髓間充質榦細胞%氧化應激%細胞凋亡%線粒體膜電位
PEP-1태%과양화경매%골수간충질간세포%양화응격%세포조망%선립체막전위
目的:研究PEP-1-CAT融合蛋白转导人大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenehymal stem ceils,MSC)的能力,以及其预处理对MSC在氧化应激损伤条件下凋亡的影响及其机制.方法:采用流式细胞仪检测MSC表面标记物CD29、CD90、CD45、CD34,并检测成脂肪细胞和成骨细胞的诱导分化能力.采用免疫荧光染色和Western blot检测融合蛋白His-CAT和His-PEP-1-CAT转导入MSC的能力.DAPI染色和流式细胞仪检测细胞的凋亡率,采用相应的试剂盒分别检测丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变和线粒体膜电位的变化.结果:MSC低表达CD34(1.78％)、CD45(1.41％),高表达CD29 (94.3％)、CD90( 95.5％),具有成脂、成骨多向分化的潜能.PEP-1 -CAT转导人MSC中呈现时间和剂量依赖性特征,而His-CAT不能进入细胞内.与His-CAT组相比较,PEP-1-CAT融合蛋白预处理组MSC的凋亡率明显降低,LDH和MDA含量明显下降,减轻了因氧化应激引起的线粒体膜电位的下降.结论:PEP-1-CAT融合蛋白通过清除活性氧,维持线粒体膜电位的稳定,显著抑制了MSC在氧化应激损伤情况下的凋亡.
目的:研究PEP-1-CAT融閤蛋白轉導人大鼠骨髓間充質榦細胞(Bone marrow mesenehymal stem ceils,MSC)的能力,以及其預處理對MSC在氧化應激損傷條件下凋亡的影響及其機製.方法:採用流式細胞儀檢測MSC錶麵標記物CD29、CD90、CD45、CD34,併檢測成脂肪細胞和成骨細胞的誘導分化能力.採用免疫熒光染色和Western blot檢測融閤蛋白His-CAT和His-PEP-1-CAT轉導入MSC的能力.DAPI染色和流式細胞儀檢測細胞的凋亡率,採用相應的試劑盒分彆檢測丙二醛(MDA)含量、乳痠脫氫酶(LDH)活性的改變和線粒體膜電位的變化.結果:MSC低錶達CD34(1.78％)、CD45(1.41％),高錶達CD29 (94.3％)、CD90( 95.5％),具有成脂、成骨多嚮分化的潛能.PEP-1 -CAT轉導人MSC中呈現時間和劑量依賴性特徵,而His-CAT不能進入細胞內.與His-CAT組相比較,PEP-1-CAT融閤蛋白預處理組MSC的凋亡率明顯降低,LDH和MDA含量明顯下降,減輕瞭因氧化應激引起的線粒體膜電位的下降.結論:PEP-1-CAT融閤蛋白通過清除活性氧,維持線粒體膜電位的穩定,顯著抑製瞭MSC在氧化應激損傷情況下的凋亡.
목적:연구PEP-1-CAT융합단백전도인대서골수간충질간세포(Bone marrow mesenehymal stem ceils,MSC)적능력,이급기예처리대MSC재양화응격손상조건하조망적영향급기궤제.방법:채용류식세포의검측MSC표면표기물CD29、CD90、CD45、CD34,병검측성지방세포화성골세포적유도분화능력.채용면역형광염색화Western blot검측융합단백His-CAT화His-PEP-1-CAT전도입MSC적능력.DAPI염색화류식세포의검측세포적조망솔,채용상응적시제합분별검측병이철(MDA)함량、유산탈경매(LDH)활성적개변화선립체막전위적변화.결과:MSC저표체CD34(1.78％)、CD45(1.41％),고표체CD29 (94.3％)、CD90( 95.5％),구유성지、성골다향분화적잠능.PEP-1 -CAT전도인MSC중정현시간화제량의뢰성특정,이His-CAT불능진입세포내.여His-CAT조상비교,PEP-1-CAT융합단백예처리조MSC적조망솔명현강저,LDH화MDA함량명현하강,감경료인양화응격인기적선립체막전위적하강.결론:PEP-1-CAT융합단백통과청제활성양,유지선립체막전위적은정,현저억제료MSC재양화응격손상정황하적조망.
