岭南心血管病杂志
嶺南心血管病雜誌
령남심혈관병잡지
SOUTH CHINA JOURNAL OF CARDIOLOGY
2012年
5期
528-534
,共7页
人工血管%血管内皮生长因子%内皮细胞%内皮化%腺病毒
人工血管%血管內皮生長因子%內皮細胞%內皮化%腺病毒
인공혈관%혈관내피생장인자%내피세포%내피화%선병독
目的 构建携带血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因腺病毒的人工血管模型.方法 测定ad5-EGFP转染EAhy926转染率,观察人工血管携带腺病毒在静水中的释放情况及人工血管上内皮细胞的黏附情况,构建ad5-VEGF165-IRES-EGFP转染EAhy926,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测VEGF基因水平表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测VEGF蛋白水平表达,噻唑蓝(MTT)法检测内皮细胞活性.结果 ad5转染EAhy926的最适感染复数(MOI)为200.人工血管上携带的病毒静水中能在人工血管上保留1h左右,逐渐释放.扫描电镜显示内皮细胞在人工血管上吸附.聚合酶链反应半定量电泳图中,ad5-hVEGF165转染组均可见564 bp条带,而ad5-Null组和空白组均未见此条带.ad5-hVEGF165组培养液中hVEGF165蛋白浓度在各时间点均高于ad5-Null组和空白组,差异有统计学意义(P＜0.01).ad5-hVEGF165组噻唑蓝试验后第3、5、7天测得的OD值高于ad5-Null组和空白组,差异有统计学意义(P＜0.O1).结论 本实验成功构建携带VEGF基因腺病毒的人工血管.
目的 構建攜帶血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因腺病毒的人工血管模型.方法 測定ad5-EGFP轉染EAhy926轉染率,觀察人工血管攜帶腺病毒在靜水中的釋放情況及人工血管上內皮細胞的黏附情況,構建ad5-VEGF165-IRES-EGFP轉染EAhy926,反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)半定量檢測VEGF基因水平錶達,酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢測VEGF蛋白水平錶達,噻唑藍(MTT)法檢測內皮細胞活性.結果 ad5轉染EAhy926的最適感染複數(MOI)為200.人工血管上攜帶的病毒靜水中能在人工血管上保留1h左右,逐漸釋放.掃描電鏡顯示內皮細胞在人工血管上吸附.聚閤酶鏈反應半定量電泳圖中,ad5-hVEGF165轉染組均可見564 bp條帶,而ad5-Null組和空白組均未見此條帶.ad5-hVEGF165組培養液中hVEGF165蛋白濃度在各時間點均高于ad5-Null組和空白組,差異有統計學意義(P＜0.01).ad5-hVEGF165組噻唑藍試驗後第3、5、7天測得的OD值高于ad5-Null組和空白組,差異有統計學意義(P＜0.O1).結論 本實驗成功構建攜帶VEGF基因腺病毒的人工血管.
목적 구건휴대혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)기인선병독적인공혈관모형.방법 측정ad5-EGFP전염EAhy926전염솔,관찰인공혈관휴대선병독재정수중적석방정황급인공혈관상내피세포적점부정황,구건ad5-VEGF165-IRES-EGFP전염EAhy926,반전록취합매련반응(RT-PCR)반정량검측VEGF기인수평표체,매련면역흡부시험(ELISA)법검측VEGF단백수평표체,새서람(MTT)법검측내피세포활성.결과 ad5전염EAhy926적최괄감염복수(MOI)위200.인공혈관상휴대적병독정수중능재인공혈관상보류1h좌우,축점석방.소묘전경현시내피세포재인공혈관상흡부.취합매련반응반정량전영도중,ad5-hVEGF165전염조균가견564 bp조대,이ad5-Null조화공백조균미견차조대.ad5-hVEGF165조배양액중hVEGF165단백농도재각시간점균고우ad5-Null조화공백조,차이유통계학의의(P＜0.01).ad5-hVEGF165조새서람시험후제3、5、7천측득적OD치고우ad5-Null조화공백조,차이유통계학의의(P＜0.O1).결론 본실험성공구건휴대VEGF기인선병독적인공혈관.
