肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2012年
10期
782-788
,共7页
马强%常宗宏%王维%王彪猛
馬彊%常宗宏%王維%王彪猛
마강%상종굉%왕유%왕표맹
结直肠肿瘤%抗药性,肿瘤%信号转导%mTOR
結直腸腫瘤%抗藥性,腫瘤%信號轉導%mTOR
결직장종류%항약성,종류%신호전도%mTOR
目的:通过雷帕霉素(rapamycin,RAPA)抑制哺乳动物雷帕霉素靶分子(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路,观察结直肠癌多药耐药LoVo/ADR细胞对多柔比星的敏感性、自噬、凋亡及多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)表达的变化,探讨mTOR通路调控结直肠癌多药耐药的可能机制.方法:多柔比星联合RAPA作用后,MTT法检测多柔比星对LoVo/ADR细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值;多柔比星和RAPA单独或联合作用后,在透射电子显微镜和荧光显微镜下观察LoVo/ADR细胞自噬体的形成,FCM分析细胞的自噬率和细胞凋亡率；RAPA作用后,RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测LoVo/ADR细胞中MDR1 mRNA和P-糖蛋白的表达.结果:25和50 μmol/L RAPA作用下,多柔比星对LoVo/ADR细胞的IC50值均低于不加RAPA的对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组LoVo/ADR细胞中很少或几乎看不到自噬体或点状绿色荧光分布,细胞自噬率为(2.9±0.4)％;多柔比星组和RAPA组LoVo/ADR细胞中可见自噬体形成,散在点状绿色荧光分布于细胞质及细胞核周围,细胞自噬率分别为(35.5±5.4)％和(46.7±6.7)％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；多柔比星联合RAPA组LoVo/ADR细胞中可见大量自噬体形成,细胞的自噬率为(73.1±7.4)％,显著高于多柔比星或RAPA单独作用组(P＜0.05).RAPA组和多柔比星组的细胞凋亡率分别为(2.06±0.43)％和(48.39±6.47)％,多柔比星组的细胞凋亡率高于对照组(2.23±0.50)％(P＜0.05)；多柔比星联合RAPA组的细胞凋亡率为(79.43±8.28)％,高于多柔比星组(P＜0.05).RAPA作用后,LoVo/ADR细胞中MDR1 mRNA和P-糖蛋白表达下调.结论:抑制mTOR通路具有逆转结直肠癌细胞多药耐药性的作用,其机制可能与RAPA促使耐药细胞自噬、凋亡及下调MDR1 mRNA的表达有关.
目的:通過雷帕黴素(rapamycin,RAPA)抑製哺乳動物雷帕黴素靶分子(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路,觀察結直腸癌多藥耐藥LoVo/ADR細胞對多柔比星的敏感性、自噬、凋亡及多藥耐藥基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)錶達的變化,探討mTOR通路調控結直腸癌多藥耐藥的可能機製.方法:多柔比星聯閤RAPA作用後,MTT法檢測多柔比星對LoVo/ADR細胞的半數抑製濃度(half inhibitory concentration,IC50)值;多柔比星和RAPA單獨或聯閤作用後,在透射電子顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察LoVo/ADR細胞自噬體的形成,FCM分析細胞的自噬率和細胞凋亡率；RAPA作用後,RT-PCR和免疫細胞化學法分彆檢測LoVo/ADR細胞中MDR1 mRNA和P-糖蛋白的錶達.結果:25和50 μmol/L RAPA作用下,多柔比星對LoVo/ADR細胞的IC50值均低于不加RAPA的對照組,差異有統計學意義(P＜0.05).對照組LoVo/ADR細胞中很少或幾乎看不到自噬體或點狀綠色熒光分佈,細胞自噬率為(2.9±0.4)％;多柔比星組和RAPA組LoVo/ADR細胞中可見自噬體形成,散在點狀綠色熒光分佈于細胞質及細胞覈週圍,細胞自噬率分彆為(35.5±5.4)％和(46.7±6.7)％,與對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)；多柔比星聯閤RAPA組LoVo/ADR細胞中可見大量自噬體形成,細胞的自噬率為(73.1±7.4)％,顯著高于多柔比星或RAPA單獨作用組(P＜0.05).RAPA組和多柔比星組的細胞凋亡率分彆為(2.06±0.43)％和(48.39±6.47)％,多柔比星組的細胞凋亡率高于對照組(2.23±0.50)％(P＜0.05)；多柔比星聯閤RAPA組的細胞凋亡率為(79.43±8.28)％,高于多柔比星組(P＜0.05).RAPA作用後,LoVo/ADR細胞中MDR1 mRNA和P-糖蛋白錶達下調.結論:抑製mTOR通路具有逆轉結直腸癌細胞多藥耐藥性的作用,其機製可能與RAPA促使耐藥細胞自噬、凋亡及下調MDR1 mRNA的錶達有關.
목적:통과뢰파매소(rapamycin,RAPA)억제포유동물뢰파매소파분자(mammalian target of rapamycin,mTOR)통로,관찰결직장암다약내약LoVo/ADR세포대다유비성적민감성、자서、조망급다약내약기인1(multidrug resistance gene 1,MDR1)표체적변화,탐토mTOR통로조공결직장암다약내약적가능궤제.방법:다유비성연합RAPA작용후,MTT법검측다유비성대LoVo/ADR세포적반수억제농도(half inhibitory concentration,IC50)치;다유비성화RAPA단독혹연합작용후,재투사전자현미경화형광현미경하관찰LoVo/ADR세포자서체적형성,FCM분석세포적자서솔화세포조망솔；RAPA작용후,RT-PCR화면역세포화학법분별검측LoVo/ADR세포중MDR1 mRNA화P-당단백적표체.결과:25화50 μmol/L RAPA작용하,다유비성대LoVo/ADR세포적IC50치균저우불가RAPA적대조조,차이유통계학의의(P＜0.05).대조조LoVo/ADR세포중흔소혹궤호간불도자서체혹점상록색형광분포,세포자서솔위(2.9±0.4)％;다유비성조화RAPA조LoVo/ADR세포중가견자서체형성,산재점상록색형광분포우세포질급세포핵주위,세포자서솔분별위(35.5±5.4)％화(46.7±6.7)％,여대조조비교차이유통계학의의(P＜0.05)；다유비성연합RAPA조LoVo/ADR세포중가견대량자서체형성,세포적자서솔위(73.1±7.4)％,현저고우다유비성혹RAPA단독작용조(P＜0.05).RAPA조화다유비성조적세포조망솔분별위(2.06±0.43)％화(48.39±6.47)％,다유비성조적세포조망솔고우대조조(2.23±0.50)％(P＜0.05)；다유비성연합RAPA조적세포조망솔위(79.43±8.28)％,고우다유비성조(P＜0.05).RAPA작용후,LoVo/ADR세포중MDR1 mRNA화P-당단백표체하조.결론:억제mTOR통로구유역전결직장암세포다약내약성적작용,기궤제가능여RAPA촉사내약세포자서、조망급하조MDR1 mRNA적표체유관.
