畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
10期
1589-1597
,共9页
张宜娜%李珂%周永辉%张继希%杨青原%慕春龙%郭国富%夏平安%崔保安
張宜娜%李珂%週永輝%張繼希%楊青原%慕春龍%郭國富%夏平安%崔保安
장의나%리가%주영휘%장계희%양청원%모춘룡%곽국부%하평안%최보안
PRRSV%免疫复合物%IFN-α%IL-10%TNF-α
PRRSV%免疫複閤物%IFN-α%IL-10%TNF-α
PRRSV%면역복합물%IFN-α%IL-10%TNF-α
本试验通过研究免疫复合物影响猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在巨噬细胞内增殖的因素,来进一步探讨免疫复合物经FcγR介导的PRRSV感染机制.本研究将含200 TCID50 PRRSV病毒液与等体积的终浓度为1.30 mg· mL-1的猪IgG-兔抗猪IgG复合物分别先后和同时接种于PAM细胞,分别于12、24、36、48 h收集细胞液,同时设PRRSV感染对照组、免疫复合物对照组和健康细胞对照组,利用建立的相对荧光定量PCR和绝对荧光定量PCR方法分别检测巨噬细胞中IFN-α、IL-10和TNF-α的mRNA转录水平及PRRSV的RNA水平,并进行定量分析,同时采用ELISA方法检测健康细胞中IFN-α的蛋白水平.结果显示,在感染后12～36 h期间,免疫复合物能够抑制PRRSV诱导的IFN-α的mRNA水平,TNF-α mRNA水平在感染后12 h被促进,而在24～36 h期间被抑制.在感染后48 h,免疫复合物能促进IFN-α和TNF-α的mRNA水平,而在12～48 h期间均能抑制IL-10的mRNA水平,此外,免疫复合物在感染12、24和36 h时间段内均能明显促进病毒的增殖,但在48 h后不显著.健康细胞中IFN-α的蛋白水平在培养12～48 h之内呈“降-升-降”的趋势.结果表明,IFN-α蛋白的表达与其mRNA的转录不同步.在PRRSV感染初期,免疫复合物能抑制PRRSV诱导的抗病毒因子的mRNA水平,病毒的复制被促进,而在感染后期,抗病毒因子达到一定的浓度后发挥抗病毒作用,在一定程度上抑制病毒的复制.而TNF-α的转录规律不明显,表明免疫复合物可能同时与激活型和抑制型FcγR结合来共同调节PRRSV诱导的细胞因子的转录.
本試驗通過研究免疫複閤物影響豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)在巨噬細胞內增殖的因素,來進一步探討免疫複閤物經FcγR介導的PRRSV感染機製.本研究將含200 TCID50 PRRSV病毒液與等體積的終濃度為1.30 mg· mL-1的豬IgG-兔抗豬IgG複閤物分彆先後和同時接種于PAM細胞,分彆于12、24、36、48 h收集細胞液,同時設PRRSV感染對照組、免疫複閤物對照組和健康細胞對照組,利用建立的相對熒光定量PCR和絕對熒光定量PCR方法分彆檢測巨噬細胞中IFN-α、IL-10和TNF-α的mRNA轉錄水平及PRRSV的RNA水平,併進行定量分析,同時採用ELISA方法檢測健康細胞中IFN-α的蛋白水平.結果顯示,在感染後12～36 h期間,免疫複閤物能夠抑製PRRSV誘導的IFN-α的mRNA水平,TNF-α mRNA水平在感染後12 h被促進,而在24～36 h期間被抑製.在感染後48 h,免疫複閤物能促進IFN-α和TNF-α的mRNA水平,而在12～48 h期間均能抑製IL-10的mRNA水平,此外,免疫複閤物在感染12、24和36 h時間段內均能明顯促進病毒的增殖,但在48 h後不顯著.健康細胞中IFN-α的蛋白水平在培養12～48 h之內呈“降-升-降”的趨勢.結果錶明,IFN-α蛋白的錶達與其mRNA的轉錄不同步.在PRRSV感染初期,免疫複閤物能抑製PRRSV誘導的抗病毒因子的mRNA水平,病毒的複製被促進,而在感染後期,抗病毒因子達到一定的濃度後髮揮抗病毒作用,在一定程度上抑製病毒的複製.而TNF-α的轉錄規律不明顯,錶明免疫複閤物可能同時與激活型和抑製型FcγR結閤來共同調節PRRSV誘導的細胞因子的轉錄.
본시험통과연구면역복합물영향저번식여호흡종합정병독(PRRSV)재거서세포내증식적인소,래진일보탐토면역복합물경FcγR개도적PRRSV감염궤제.본연구장함200 TCID50 PRRSV병독액여등체적적종농도위1.30 mg· mL-1적저IgG-토항저IgG복합물분별선후화동시접충우PAM세포,분별우12、24、36、48 h수집세포액,동시설PRRSV감염대조조、면역복합물대조조화건강세포대조조,이용건립적상대형광정량PCR화절대형광정량PCR방법분별검측거서세포중IFN-α、IL-10화TNF-α적mRNA전록수평급PRRSV적RNA수평,병진행정량분석,동시채용ELISA방법검측건강세포중IFN-α적단백수평.결과현시,재감염후12～36 h기간,면역복합물능구억제PRRSV유도적IFN-α적mRNA수평,TNF-α mRNA수평재감염후12 h피촉진,이재24～36 h기간피억제.재감염후48 h,면역복합물능촉진IFN-α화TNF-α적mRNA수평,이재12～48 h기간균능억제IL-10적mRNA수평,차외,면역복합물재감염12、24화36 h시간단내균능명현촉진병독적증식,단재48 h후불현저.건강세포중IFN-α적단백수평재배양12～48 h지내정“강-승-강”적추세.결과표명,IFN-α단백적표체여기mRNA적전록불동보.재PRRSV감염초기,면역복합물능억제PRRSV유도적항병독인자적mRNA수평,병독적복제피촉진,이재감염후기,항병독인자체도일정적농도후발휘항병독작용,재일정정도상억제병독적복제.이TNF-α적전록규률불명현,표명면역복합물가능동시여격활형화억제형FcγR결합래공동조절PRRSV유도적세포인자적전록.
