安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
28期
13709-13712,13719
,共5页
周国栋%李志勇%扈顺%李鸿雁%师文贵%刘磊
週國棟%李誌勇%扈順%李鴻雁%師文貴%劉磊
주국동%리지용%호순%리홍안%사문귀%류뢰
老芒麦%ISSR%正交试验%单因素试验
老芒麥%ISSR%正交試驗%單因素試驗
로망맥%ISSR%정교시험%단인소시험
[目的]建立并优化老芒麦ISSR - PCR反应体系和扩增程序,以期为探讨老芒麦种质资源的遗传多样性提供科学依据.[方法]采用正交设计试验和单因素试验相结合的方法对老芒麦的ISSR - PCR的反应体系进行构建和优化,对影响ISSR - PCR扩增效果的Taq酶、模板DNA的浓度、Mg2+、dNTP和引物浓度等因素进行优化,同时对退火温度、循环次数和延伸时间进行筛选.[结果]在25μl体系中各反应物的最适含量为:0.2 mmol/L dNTP,0.2 μmol/L ISSR引物,1.50 U Taq DNA聚合酶,2.5μl 10×PCR Buffer,1.5 mmol/L MgCl2 和40 ng模板DNA;循环次数和延伸时间分别是35次和90 s.[结论]该研究建立并优化了老芒麦ISSR - PCR反应体系,通过2份老芒麦种质对所优化体系得验证,结果显示体系稳定,可用于老芒麦种质资源遗传分析.
[目的]建立併優化老芒麥ISSR - PCR反應體繫和擴增程序,以期為探討老芒麥種質資源的遺傳多樣性提供科學依據.[方法]採用正交設計試驗和單因素試驗相結閤的方法對老芒麥的ISSR - PCR的反應體繫進行構建和優化,對影響ISSR - PCR擴增效果的Taq酶、模闆DNA的濃度、Mg2+、dNTP和引物濃度等因素進行優化,同時對退火溫度、循環次數和延伸時間進行篩選.[結果]在25μl體繫中各反應物的最適含量為:0.2 mmol/L dNTP,0.2 μmol/L ISSR引物,1.50 U Taq DNA聚閤酶,2.5μl 10×PCR Buffer,1.5 mmol/L MgCl2 和40 ng模闆DNA;循環次數和延伸時間分彆是35次和90 s.[結論]該研究建立併優化瞭老芒麥ISSR - PCR反應體繫,通過2份老芒麥種質對所優化體繫得驗證,結果顯示體繫穩定,可用于老芒麥種質資源遺傳分析.
[목적]건립병우화로망맥ISSR - PCR반응체계화확증정서,이기위탐토로망맥충질자원적유전다양성제공과학의거.[방법]채용정교설계시험화단인소시험상결합적방법대로망맥적ISSR - PCR적반응체계진행구건화우화,대영향ISSR - PCR확증효과적Taq매、모판DNA적농도、Mg2+、dNTP화인물농도등인소진행우화,동시대퇴화온도、순배차수화연신시간진행사선.[결과]재25μl체계중각반응물적최괄함량위:0.2 mmol/L dNTP,0.2 μmol/L ISSR인물,1.50 U Taq DNA취합매,2.5μl 10×PCR Buffer,1.5 mmol/L MgCl2 화40 ng모판DNA;순배차수화연신시간분별시35차화90 s.[결론]해연구건립병우화료로망맥ISSR - PCR반응체계,통과2빈로망맥충질대소우화체계득험증,결과현시체계은정,가용우로망맥충질자원유전분석.
