现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2014年
6期
1236-1238
,共3页
张红艳%张健%李丹妮%李彦姝%刘芙蓉%李丰
張紅豔%張健%李丹妮%李彥姝%劉芙蓉%李豐
장홍염%장건%리단니%리언주%류부용%리봉
Elf5%pEGFP-C1%亚细胞定位
Elf5%pEGFP-C1%亞細胞定位
Elf5%pEGFP-C1%아세포정위
Elf5%pEGFP-C1%subcellular location
目的：构建人Elf5真核细胞表达质粒，并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法：PCR扩增人Elf5基因，将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中，构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFP-hElf5。利用酶切鉴定，DNA测序，免疫印迹及免疫荧光方法鉴定Elf5真核表达质粒及Elf5蛋白的亚细胞定位。结果：经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认Elf5基因成功导入真核表达载体pEGFP-C1。瞬时转染MCF7细胞，Elf5蛋白表达在细胞核中。结论：pEGFP-Elf5真核表达质粒构建成功，Elf5定位在细胞核中。
目的：構建人Elf5真覈細胞錶達質粒，併研究其在乳腺癌MCF7細胞中的亞細胞定位。方法：PCR擴增人Elf5基因，將其剋隆入真覈錶達載體pEGFP-C1中，構建含人Elf5基因的真覈錶達質粒pEGFP-hElf5。利用酶切鑒定，DNA測序，免疫印跡及免疫熒光方法鑒定Elf5真覈錶達質粒及Elf5蛋白的亞細胞定位。結果：經酶切鑒定、DNA測序、免疫印跡方法確認Elf5基因成功導入真覈錶達載體pEGFP-C1。瞬時轉染MCF7細胞，Elf5蛋白錶達在細胞覈中。結論：pEGFP-Elf5真覈錶達質粒構建成功，Elf5定位在細胞覈中。
목적：구건인Elf5진핵세포표체질립，병연구기재유선암MCF7세포중적아세포정위。방법：PCR확증인Elf5기인，장기극륭입진핵표체재체pEGFP-C1중，구건함인Elf5기인적진핵표체질립pEGFP-hElf5。이용매절감정，DNA측서，면역인적급면역형광방법감정Elf5진핵표체질립급Elf5단백적아세포정위。결과：경매절감정、DNA측서、면역인적방법학인Elf5기인성공도입진핵표체재체pEGFP-C1。순시전염MCF7세포，Elf5단백표체재세포핵중。결론：pEGFP-Elf5진핵표체질립구건성공，Elf5정위재세포핵중。
Objective:To construct the eukaryotic pEGFP-hElf5 and identify the subcellular localization of Elf5 in MCF7 cells. Methods:Elf5 fragment was subcloned into pEGFP-C1 after PCR. The plasmid was verified by en-zyme digestion,DNA sequencing and its expression was subsequently checked by Western blot. Immunofluorescence was used to identify its subcellular location. Results:Elf5 was subcloned into pEGFP-C1 successfully. Conclusion:Eukaryotic pEGFP-hElf5 was constructed successfully and Elf5 locates in cell nucleus.
