食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2012年
7期
698-702
,共5页
唐俊妮%康铭松%周锐%史贤明%陈焕春
唐俊妮%康銘鬆%週銳%史賢明%陳煥春
당준니%강명송%주예%사현명%진환춘
金黄色葡萄球菌%sae基因%同源重组%突变株构建
金黃色葡萄毬菌%sae基因%同源重組%突變株構建
금황색포도구균%sae기인%동원중조%돌변주구건
针对金黄色葡萄球菌sae基因前后两段序列设计两对引物,PCR扩增出sae基因上下游同源臂序列,克隆到穿梭载体pBT2中;两段序列之间用来自质粒p646的Em抗性基因片段连接,作为筛选标记,从而构建同源重组穿梭质粒pBT2△sae;将pBT2△sae电转化到金黄色葡萄球菌菌株RN4220中,40℃经过七轮培养,进行抗性培养基筛选和PCR验证,以及RT-PCR观察基因表达水平.获得一株金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株RN△sae,为进一步研究sae基因的调控机制等提供有用的实验材料.
針對金黃色葡萄毬菌sae基因前後兩段序列設計兩對引物,PCR擴增齣sae基因上下遊同源臂序列,剋隆到穿梭載體pBT2中;兩段序列之間用來自質粒p646的Em抗性基因片段連接,作為篩選標記,從而構建同源重組穿梭質粒pBT2△sae;將pBT2△sae電轉化到金黃色葡萄毬菌菌株RN4220中,40℃經過七輪培養,進行抗性培養基篩選和PCR驗證,以及RT-PCR觀察基因錶達水平.穫得一株金黃色葡萄毬菌sae基因缺失突變株RN△sae,為進一步研究sae基因的調控機製等提供有用的實驗材料.
침대금황색포도구균sae기인전후량단서렬설계량대인물,PCR확증출sae기인상하유동원비서렬,극륭도천사재체pBT2중;량단서렬지간용래자질립p646적Em항성기인편단련접,작위사선표기,종이구건동원중조천사질립pBT2△sae;장pBT2△sae전전화도금황색포도구균균주RN4220중,40℃경과칠륜배양,진행항성배양기사선화PCR험증,이급RT-PCR관찰기인표체수평.획득일주금황색포도구균sae기인결실돌변주RN△sae,위진일보연구sae기인적조공궤제등제공유용적실험재료.
