山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
42期
15-17
,共3页
王安宇%魏良纲%乔艺杰%张超%张定安%何光志
王安宇%魏良綱%喬藝傑%張超%張定安%何光誌
왕안우%위량강%교예걸%장초%장정안%하광지
类风湿关节炎%Ⅱ型胶原蛋白cDNA%基因克隆%基因序列
類風濕關節炎%Ⅱ型膠原蛋白cDNA%基因剋隆%基因序列
류풍습관절염%Ⅱ형효원단백cDNA%기인극륭%기인서렬
目的 克隆人Ⅱ型胶原蛋白cDNA(hCⅡcDNA)基因.方法 以类风湿关节炎患者关节软骨组织的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hCⅡcDNA基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,在LB培养基中培养12 ～ 16 h,挑取菌落并接种于LB培养液中,取2μL菌液为模板进行PCR鉴定,PCR结果呈现特异性条带为hCⅡcDNA阳性.对hCⅡcDNA阳性的克隆菌株进行测序.结果 克隆基因经测序并通过NCBI BLAST分析后发现,其与Genebank中公布的编码人Ⅱ型胶原蛋白的基因序列(NM_001844)同源性达99％.结论 成功克隆出了hCⅡcDNA基因.
目的 剋隆人Ⅱ型膠原蛋白cDNA(hCⅡcDNA)基因.方法 以類風濕關節炎患者關節軟骨組織的RNA為模闆,採用RT-PCR技術擴增hCⅡcDNA基因,將擴增產物與pMD18-T載體連接後轉化大腸桿菌感受態細胞DH5α,在LB培養基中培養12 ～ 16 h,挑取菌落併接種于LB培養液中,取2μL菌液為模闆進行PCR鑒定,PCR結果呈現特異性條帶為hCⅡcDNA暘性.對hCⅡcDNA暘性的剋隆菌株進行測序.結果 剋隆基因經測序併通過NCBI BLAST分析後髮現,其與Genebank中公佈的編碼人Ⅱ型膠原蛋白的基因序列(NM_001844)同源性達99％.結論 成功剋隆齣瞭hCⅡcDNA基因.
목적 극륭인Ⅱ형효원단백cDNA(hCⅡcDNA)기인.방법 이류풍습관절염환자관절연골조직적RNA위모판,채용RT-PCR기술확증hCⅡcDNA기인,장확증산물여pMD18-T재체련접후전화대장간균감수태세포DH5α,재LB배양기중배양12 ～ 16 h,도취균락병접충우LB배양액중,취2μL균액위모판진행PCR감정,PCR결과정현특이성조대위hCⅡcDNA양성.대hCⅡcDNA양성적극륭균주진행측서.결과 극륭기인경측서병통과NCBI BLAST분석후발현,기여Genebank중공포적편마인Ⅱ형효원단백적기인서렬(NM_001844)동원성체99％.결론 성공극륭출료hCⅡcDNA기인.
