中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2012年
5期
447-452
,共6页
王巧真%金真真%彭挺%管英俊%李和
王巧真%金真真%彭挺%管英俊%李和
왕교진%금진진%팽정%관영준%리화
钙反应性反式激活因子%小鼠神经母细胞瘤细胞%神经元分化
鈣反應性反式激活因子%小鼠神經母細胞瘤細胞%神經元分化
개반응성반식격활인자%소서신경모세포류세포%신경원분화
目的 探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关.方法 选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化.接种和培养N2a细胞12～24 h后,将其分为对照组和无血清诱导组,对照组继续在含5％胎牛血清(FBS)的培养基中培养,无血清诱导组在不含FBS的培养基中培养.采用免疫印迹技术、免疫荧光技术和RT-PCR检测无血清诱导分化对N2a细胞CREST蛋白和mRNA表达的影响.结果 在含5％胎牛血清(FBS)培养基培养的对照N2a细胞中,CREST蛋白水平在各时间点均无明显变化,CREST mRNA水平仅在培养48 h后略有升高.而在无血清诱导分化的N2a细胞中,CREST蛋白表达水平在无血清诱导12h时无明显变化,但在诱导24 h后明显升高,诱导48h后进一步升高；RT-PCR检测显示,CREST mRNA在无血清诱导12h后即开始升高,诱导24 h和48h则升高更为明显.结论 无血清诱导分化的N2a细胞中CREST的表达上调,提示CREST可能参与神经细胞的分化.
目的 探討鈣反應性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否與神經細胞的分化有關.方法 選用在促分化因素作用下具有分化為神經元能力的小鼠神經母細胞瘤(N2a)細胞,用無血清培養(血清撤除)誘導N2a細胞分化.接種和培養N2a細胞12～24 h後,將其分為對照組和無血清誘導組,對照組繼續在含5％胎牛血清(FBS)的培養基中培養,無血清誘導組在不含FBS的培養基中培養.採用免疫印跡技術、免疫熒光技術和RT-PCR檢測無血清誘導分化對N2a細胞CREST蛋白和mRNA錶達的影響.結果 在含5％胎牛血清(FBS)培養基培養的對照N2a細胞中,CREST蛋白水平在各時間點均無明顯變化,CREST mRNA水平僅在培養48 h後略有升高.而在無血清誘導分化的N2a細胞中,CREST蛋白錶達水平在無血清誘導12h時無明顯變化,但在誘導24 h後明顯升高,誘導48h後進一步升高；RT-PCR檢測顯示,CREST mRNA在無血清誘導12h後即開始升高,誘導24 h和48h則升高更為明顯.結論 無血清誘導分化的N2a細胞中CREST的錶達上調,提示CREST可能參與神經細胞的分化.
목적 탐토개반응성반식격활인자(calcium-responsive transactivator,CREST)시부여신경세포적분화유관.방법 선용재촉분화인소작용하구유분화위신경원능력적소서신경모세포류(N2a)세포,용무혈청배양(혈청철제)유도N2a세포분화.접충화배양N2a세포12～24 h후,장기분위대조조화무혈청유도조,대조조계속재함5％태우혈청(FBS)적배양기중배양,무혈청유도조재불함FBS적배양기중배양.채용면역인적기술、면역형광기술화RT-PCR검측무혈청유도분화대N2a세포CREST단백화mRNA표체적영향.결과 재함5％태우혈청(FBS)배양기배양적대조N2a세포중,CREST단백수평재각시간점균무명현변화,CREST mRNA수평부재배양48 h후략유승고.이재무혈청유도분화적N2a세포중,CREST단백표체수평재무혈청유도12h시무명현변화,단재유도24 h후명현승고,유도48h후진일보승고；RT-PCR검측현시,CREST mRNA재무혈청유도12h후즉개시승고,유도24 h화48h칙승고경위명현.결론 무혈청유도분화적N2a세포중CREST적표체상조,제시CREST가능삼여신경세포적분화.
