石河子大学学报（自然科学版）
石河子大學學報（自然科學版）
석하자대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2012年
5期
587-591
,共5页
杜鑫立%惠文巧%赵博%郭玉强%马军德%马世俊%木叶沙尔·巴吐尔%刘贤侠%贾斌
杜鑫立%惠文巧%趙博%郭玉彊%馬軍德%馬世俊%木葉沙爾·巴吐爾%劉賢俠%賈斌
두흠립%혜문교%조박%곽옥강%마군덕%마세준%목협사이·파토이%류현협%가빈
哈萨克绵羊%MHC-DRB1%包虫病%抑制性消减杂交%六钩蚴
哈薩剋綿羊%MHC-DRB1%包蟲病%抑製性消減雜交%六鉤蚴
합살극면양%MHC-DRB1%포충병%억제성소감잡교%륙구유
为了分离两种MHC-DRB1单倍型哈萨克绵羊个体在细粒棘球六钩蚴侵染期小肠组织的差异表达基因,试验在实验室前期采用PCR-RFLP方法筛选获得这两种MHC-DRB1单倍型(包虫病抗性相关的MHC-DRB1 MvaIbc-SacIIab-Hin1Iab单倍型和包虫病非抗性相关的MHC-DRB1 MvaIbb-SacIIaa-Hin1Iaa单倍型)的基础上,采用抑制性消减杂交技术构建了以非抗性相关哈萨克绵羊六钩蚴侵染期小肠cDNA为实验方(Tester),抗性相关哈萨克绵羊六钩蚴侵染期小肠cDNA为消减方(Driver)的消减文库.结果显示:以内参基因GAPDH为指标,检测文库的消减效率为215倍;从文库中随机挑选98个阳性克隆进行了PCR检测,显示插入片段的大小分布于150～1000bp.结论:消减文库的构建成功,为进一步分离和鉴定相关的差异表达基因,探讨包虫病抗性相关MHC-DRB1单倍型哈萨克绵羊抵抗六钩蚴侵染的分子作用机制奠定了研究基础.
為瞭分離兩種MHC-DRB1單倍型哈薩剋綿羊箇體在細粒棘毬六鉤蚴侵染期小腸組織的差異錶達基因,試驗在實驗室前期採用PCR-RFLP方法篩選穫得這兩種MHC-DRB1單倍型(包蟲病抗性相關的MHC-DRB1 MvaIbc-SacIIab-Hin1Iab單倍型和包蟲病非抗性相關的MHC-DRB1 MvaIbb-SacIIaa-Hin1Iaa單倍型)的基礎上,採用抑製性消減雜交技術構建瞭以非抗性相關哈薩剋綿羊六鉤蚴侵染期小腸cDNA為實驗方(Tester),抗性相關哈薩剋綿羊六鉤蚴侵染期小腸cDNA為消減方(Driver)的消減文庫.結果顯示:以內參基因GAPDH為指標,檢測文庫的消減效率為215倍;從文庫中隨機挑選98箇暘性剋隆進行瞭PCR檢測,顯示插入片段的大小分佈于150～1000bp.結論:消減文庫的構建成功,為進一步分離和鑒定相關的差異錶達基因,探討包蟲病抗性相關MHC-DRB1單倍型哈薩剋綿羊牴抗六鉤蚴侵染的分子作用機製奠定瞭研究基礎.
위료분리량충MHC-DRB1단배형합살극면양개체재세립극구륙구유침염기소장조직적차이표체기인,시험재실험실전기채용PCR-RFLP방법사선획득저량충MHC-DRB1단배형(포충병항성상관적MHC-DRB1 MvaIbc-SacIIab-Hin1Iab단배형화포충병비항성상관적MHC-DRB1 MvaIbb-SacIIaa-Hin1Iaa단배형)적기출상,채용억제성소감잡교기술구건료이비항성상관합살극면양륙구유침염기소장cDNA위실험방(Tester),항성상관합살극면양륙구유침염기소장cDNA위소감방(Driver)적소감문고.결과현시:이내삼기인GAPDH위지표,검측문고적소감효솔위215배;종문고중수궤도선98개양성극륭진행료PCR검측,현시삽입편단적대소분포우150～1000bp.결론:소감문고적구건성공,위진일보분리화감정상관적차이표체기인,탐토포충병항성상관MHC-DRB1단배형합살극면양저항륙구유침염적분자작용궤제전정료연구기출.
