解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
5期
717-722
,共6页
林贤丰%邵营宽%王辉%邵培刚%严夏霖%陈杨%金可可%张建色%梅劲
林賢豐%邵營寬%王輝%邵培剛%嚴夏霖%陳楊%金可可%張建色%梅勁
림현봉%소영관%왕휘%소배강%엄하림%진양%금가가%장건색%매경
去细胞%胰腺%细胞外基质%组织工程%免疫荧光染色%大鼠
去細胞%胰腺%細胞外基質%組織工程%免疫熒光染色%大鼠
거세포%이선%세포외기질%조직공정%면역형광염색%대서
目的 通过离体灌注加浸泡的方法制备大鼠胰腺去细胞生物支架(PDBC),为胰岛和胰腺的组织工程研究提供新型天然生物支架. 方法 健康成年大鼠20只,以物理冻融及灌注洗脱法(脱氧胆酸钠+ DNAase),采用胆管、胰管联合逆向在体灌流法获取胰腺去细胞生物支架.并通过基因组DNA定量定性分析,组织化学染色、免疫荧光组织化学染色、荧光积分吸光度分析、透射电镜观察等进一步测定细胞残留以及观察去细胞支架,如胶原IV、纤维连接蛋白和层黏连蛋白等成分的保留. 结果 DNA定性分析显示,实验组未见明显DNA条带,对照组DNA条带可达100bp,定量检测实验组DNA残留不足对照组的5％；组织化学染色和透射电镜观察均表明,去细胞支架无细胞残留,细胞外支架连续性完好,脉管支架保存完整；免疫荧光结果表明,胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外支架成分保留较完整,未见明显细胞核成分残留. 结论 运用冻融加浸泡灌注制备的胰腺去细胞生物支架,细胞去除彻底,细胞外支架保留完好.
目的 通過離體灌註加浸泡的方法製備大鼠胰腺去細胞生物支架(PDBC),為胰島和胰腺的組織工程研究提供新型天然生物支架. 方法 健康成年大鼠20隻,以物理凍融及灌註洗脫法(脫氧膽痠鈉+ DNAase),採用膽管、胰管聯閤逆嚮在體灌流法穫取胰腺去細胞生物支架.併通過基因組DNA定量定性分析,組織化學染色、免疫熒光組織化學染色、熒光積分吸光度分析、透射電鏡觀察等進一步測定細胞殘留以及觀察去細胞支架,如膠原IV、纖維連接蛋白和層黏連蛋白等成分的保留. 結果 DNA定性分析顯示,實驗組未見明顯DNA條帶,對照組DNA條帶可達100bp,定量檢測實驗組DNA殘留不足對照組的5％；組織化學染色和透射電鏡觀察均錶明,去細胞支架無細胞殘留,細胞外支架連續性完好,脈管支架保存完整；免疫熒光結果錶明,膠原蛋白、彈性蛋白等細胞外支架成分保留較完整,未見明顯細胞覈成分殘留. 結論 運用凍融加浸泡灌註製備的胰腺去細胞生物支架,細胞去除徹底,細胞外支架保留完好.
목적 통과리체관주가침포적방법제비대서이선거세포생물지가(PDBC),위이도화이선적조직공정연구제공신형천연생물지가. 방법 건강성년대서20지,이물리동융급관주세탈법(탈양담산납+ DNAase),채용담관、이관연합역향재체관류법획취이선거세포생물지가.병통과기인조DNA정량정성분석,조직화학염색、면역형광조직화학염색、형광적분흡광도분석、투사전경관찰등진일보측정세포잔류이급관찰거세포지가,여효원IV、섬유련접단백화층점련단백등성분적보류. 결과 DNA정성분석현시,실험조미견명현DNA조대,대조조DNA조대가체100bp,정량검측실험조DNA잔류불족대조조적5％；조직화학염색화투사전경관찰균표명,거세포지가무세포잔류,세포외지가련속성완호,맥관지가보존완정；면역형광결과표명,효원단백、탄성단백등세포외지가성분보류교완정,미견명현세포핵성분잔류. 결론 운용동융가침포관주제비적이선거세포생물지가,세포거제철저,세포외지가보류완호.
