解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
5期
614-618
,共5页
王雪颖%王世坤%田铧%索宁%房云海%魏玉梅%扈燕来%宋涛
王雪穎%王世坤%田鏵%索寧%房雲海%魏玉梅%扈燕來%宋濤
왕설영%왕세곤%전화%색저%방운해%위옥매%호연래%송도
炎性因子%内皮微粒%单核细胞%脐静脉内皮细胞%免疫荧光%酶联免疫吸附法%透射电镜%人
炎性因子%內皮微粒%單覈細胞%臍靜脈內皮細胞%免疫熒光%酶聯免疫吸附法%透射電鏡%人
염성인자%내피미립%단핵세포%제정맥내피세포%면역형광%매련면역흡부법%투사전경%인
目的 探讨炎性环境中内皮微粒(EMPs)在单核细胞参与的促内皮细胞增殖中的作用,并探讨EMPs对单核细胞表达内皮细胞标志物的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激内皮细胞,超速离心法获取EMPs；用透射电镜观察其形态和结构；运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测经EMPs激活的单核细胞株THP-1对血管内皮生长因子(VEGF)中VEGF-A、VEGF-C的表达情况；将HUVECs和THP-1细胞或者经EMPs诱导的THP-1细胞共培养,检测HUVECs的增殖情况；运用RT-PCR和免疫荧光细胞化学技术,观察经EMPs激活的THP-1细胞对内皮细胞标志物vWF和血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的表达情况.结果 内皮细胞经炎性因子刺激后释放EMPs,EMPs刺激的THP-1细胞上清中VEGF-A和VEGF-C蛋白水平明显升高；HUVECs细胞增殖实验中,与THP-1细胞或者经EMPs诱导的THP-1共培养的两种情况下,HUVECs均显著增多；与EMPs共培养3d后,THP-1中vWF和VEGFR-2蛋白表达为阳性,基因表达为阴性,共培养8d后,vWF和VEGFR-2的蛋白和基因表达均为阴性.结论 炎性环境中内皮细胞释放EMPs可以促使单核细胞分泌VEGF-A和VEGF-C,后两者可使HUVECs增殖,EMPs仅能使单核细胞一过性呈现内皮表型,而不能将其转分化为内皮细胞.
目的 探討炎性環境中內皮微粒(EMPs)在單覈細胞參與的促內皮細胞增殖中的作用,併探討EMPs對單覈細胞錶達內皮細胞標誌物的影響.方法 體外培養人臍靜脈內皮細胞(HUVECs),炎性因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)刺激內皮細胞,超速離心法穫取EMPs；用透射電鏡觀察其形態和結構；運用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測經EMPs激活的單覈細胞株THP-1對血管內皮生長因子(VEGF)中VEGF-A、VEGF-C的錶達情況；將HUVECs和THP-1細胞或者經EMPs誘導的THP-1細胞共培養,檢測HUVECs的增殖情況；運用RT-PCR和免疫熒光細胞化學技術,觀察經EMPs激活的THP-1細胞對內皮細胞標誌物vWF和血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2)的錶達情況.結果 內皮細胞經炎性因子刺激後釋放EMPs,EMPs刺激的THP-1細胞上清中VEGF-A和VEGF-C蛋白水平明顯升高；HUVECs細胞增殖實驗中,與THP-1細胞或者經EMPs誘導的THP-1共培養的兩種情況下,HUVECs均顯著增多；與EMPs共培養3d後,THP-1中vWF和VEGFR-2蛋白錶達為暘性,基因錶達為陰性,共培養8d後,vWF和VEGFR-2的蛋白和基因錶達均為陰性.結論 炎性環境中內皮細胞釋放EMPs可以促使單覈細胞分泌VEGF-A和VEGF-C,後兩者可使HUVECs增殖,EMPs僅能使單覈細胞一過性呈現內皮錶型,而不能將其轉分化為內皮細胞.
목적 탐토염성배경중내피미립(EMPs)재단핵세포삼여적촉내피세포증식중적작용,병탐토EMPs대단핵세포표체내피세포표지물적영향.방법 체외배양인제정맥내피세포(HUVECs),염성인자종류배사인자α(TNF-α)자격내피세포,초속리심법획취EMPs；용투사전경관찰기형태화결구；운용매련면역흡부법(ELISA)검측경EMPs격활적단핵세포주THP-1대혈관내피생장인자(VEGF)중VEGF-A、VEGF-C적표체정황；장HUVECs화THP-1세포혹자경EMPs유도적THP-1세포공배양,검측HUVECs적증식정황；운용RT-PCR화면역형광세포화학기술,관찰경EMPs격활적THP-1세포대내피세포표지물vWF화혈관내피생장인자수체2(VEGFR-2)적표체정황.결과 내피세포경염성인자자격후석방EMPs,EMPs자격적THP-1세포상청중VEGF-A화VEGF-C단백수평명현승고；HUVECs세포증식실험중,여THP-1세포혹자경EMPs유도적THP-1공배양적량충정황하,HUVECs균현저증다；여EMPs공배양3d후,THP-1중vWF화VEGFR-2단백표체위양성,기인표체위음성,공배양8d후,vWF화VEGFR-2적단백화기인표체균위음성.결론 염성배경중내피세포석방EMPs가이촉사단핵세포분비VEGF-A화VEGF-C,후량자가사HUVECs증식,EMPs부능사단핵세포일과성정현내피표형,이불능장기전분화위내피세포.
