CAJ | 학술논문

目的:观察三苯氧胺作用前后ERα阳性细胞株T-47D和ERα阴性细胞株MDA-MB-231中共激活因子SRC-1的表达变化,研究共激活因子与内分泌治疗的内在关系.方法:四氮甲唑蓝(MTT)观察两细胞的生存状况,以筛选最佳的药物作用浓度和时间.单细胞凝胶电泳法(Comet法)检测细胞凋亡.细胞免疫组化法观察TAM作用前后细胞中ERα和SRC-1的表达情况.Western blot法检测TAM作用前后细胞中ERα和SRC-1的表达水平变化情况.结果:MTT法测得TAM作用后T-47D和MDA-MB-231的OD值下降,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),对T-47D效果更强.0.10mmol/L TAM作用48 h后两种细胞的活力均出现最低值.单细胞凝胶电泳法观察到TAM作用后两组细胞均发生凋亡、染色体断裂现象,尾长、尾DNA％、尾矩、Olive尾矩等指标在给药组与对照组之间有显著性差异,T-47D与MDA-MB-231组相比也有显著性差异(P＜0.05).细胞免疫组化法检测T-47D细胞在TAM作用后ERα阳性细胞减少,SRC-1在作用前后均为阴性;MDA-MB-231细胞SRC-1表达阳性,TAM作用后,SRC-1阳性细胞比例上调,ERα仍为阴性.Western blot结果显示TAM作用后,T-47D细胞ERα表达水平略有下降,SRC-1表达水平未见改变;MDA-MB-231细胞SRC-1表达水平略有升高,ERα表达水平未见改变.结论:在ERα阴性细胞株MDA-MB-231中,共激活因子SRC-1有较高水平表达.0.10mmol/L TAM作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231 48 h后SRC-1表达轻微上调,此变化可不依赖于ERα的表达.
목적:관찰삼분양알작용전후ERα양성세포주T-47D화ERα음성세포주MDA-MB-231중공격활인자SRC-1적표체변화,연구공격활인자여내분비치료적내재관계.방법:사담갑서람(MTT)관찰량세포적생존상황,이사선최가적약물작용농도화시간.단세포응효전영법(Comet법)검측세포조망.세포면역조화법관찰TAM작용전후세포중ERα화SRC-1적표체정황.Western blot법검측TAM작용전후세포중ERα화SRC-1적표체수평변화정황.결과:MTT법측득TAM작용후T-47D화MDA-MB-231적OD치하강,여대조조상비유현저성차이(P＜0.05),대T-47D효과경강.0.10mmol/L TAM작용48 h후량충세포적활력균출현최저치.단세포응효전영법관찰도TAM작용후량조세포균발생조망、염색체단렬현상,미장、미DNA％、미구、Olive미구등지표재급약조여대조조지간유현저성차이,T-47D여MDA-MB-231조상비야유현저성차이(P＜0.05).세포면역조화법검측T-47D세포재TAM작용후ERα양성세포감소,SRC-1재작용전후균위음성;MDA-MB-231세포SRC-1표체양성,TAM작용후,SRC-1양성세포비례상조,ERα잉위음성.Western blot결과현시TAM작용후,T-47D세포ERα표체수평략유하강,SRC-1표체수평미견개변;MDA-MB-231세포SRC-1표체수평략유승고,ERα표체수평미견개변.결론:재ERα음성세포주MDA-MB-231중,공격활인자SRC-1유교고수평표체.0.10mmol/L TAM작용우유선암세포MDA-MB-231 48 h후SRC-1표체경미상조,차변화가불의뢰우ERα적표체.