实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2012年
20期
1596-1599
,共4页
范玉颖%张俊梅%王华%赵晓春
範玉穎%張俊梅%王華%趙曉春
범옥영%장준매%왕화%조효춘
星形胶质细胞%氧糖剥夺%缺氧缺血%增殖
星形膠質細胞%氧糖剝奪%缺氧缺血%增殖
성형효질세포%양당박탈%결양결혈%증식
目的 建立良好的模拟缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞增殖的体外模型的方法.方法 采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法测定星形胶质细胞活力,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)掺入法检测星形胶质细胞DNA合成,免疫组织化学染色法检测星形胶质细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达.比较原代大鼠星形胶质细胞在氧糖剥夺(OGD),10 mL·L-1氧气、无糖含血清培养基)培养不同时间(0h、3h、6h、9h)的增殖情况.结果 CCK-8检测结果显示随OGD培养时间延长,原代大鼠星形胶质细胞活力逐渐增强,6h达高峰,与相应时间点正常培养组比较差异有统计学意义；随后减弱,9h已接近正常培养组水平.OGD培养后,原代大鼠星形胶质细胞EdU和PCNA阳性细胞率逐渐增加,6h达最高水平,与相应时间点的正常培养组比较差异有统计学意义；而后下降,至9h与正常培养组比较差异无统计学意义.结论 OGD培养6h可成功模拟体内缺氧缺血后星形胶质细胞增殖改变,为进行缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞过度增殖的相关研究提供了稳定可靠的体外实验模型和理论依据.
目的 建立良好的模擬缺氧缺血性腦損傷後星形膠質細胞增殖的體外模型的方法.方法 採用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法測定星形膠質細胞活力,5-乙炔基-2′脫氧尿嘧啶覈苷(EdU)摻入法檢測星形膠質細胞DNA閤成,免疫組織化學染色法檢測星形膠質細胞增殖細胞覈抗原(PCNA)錶達.比較原代大鼠星形膠質細胞在氧糖剝奪(OGD),10 mL·L-1氧氣、無糖含血清培養基)培養不同時間(0h、3h、6h、9h)的增殖情況.結果 CCK-8檢測結果顯示隨OGD培養時間延長,原代大鼠星形膠質細胞活力逐漸增彊,6h達高峰,與相應時間點正常培養組比較差異有統計學意義；隨後減弱,9h已接近正常培養組水平.OGD培養後,原代大鼠星形膠質細胞EdU和PCNA暘性細胞率逐漸增加,6h達最高水平,與相應時間點的正常培養組比較差異有統計學意義；而後下降,至9h與正常培養組比較差異無統計學意義.結論 OGD培養6h可成功模擬體內缺氧缺血後星形膠質細胞增殖改變,為進行缺氧缺血性腦損傷後星形膠質細胞過度增殖的相關研究提供瞭穩定可靠的體外實驗模型和理論依據.
목적 건립량호적모의결양결혈성뇌손상후성형효질세포증식적체외모형적방법.방법 채용CCK-8(Cell Counting Kit-8)법측정성형효질세포활력,5-을결기-2′탈양뇨밀정핵감(EdU)참입법검측성형효질세포DNA합성,면역조직화학염색법검측성형효질세포증식세포핵항원(PCNA)표체.비교원대대서성형효질세포재양당박탈(OGD),10 mL·L-1양기、무당함혈청배양기)배양불동시간(0h、3h、6h、9h)적증식정황.결과 CCK-8검측결과현시수OGD배양시간연장,원대대서성형효질세포활력축점증강,6h체고봉,여상응시간점정상배양조비교차이유통계학의의；수후감약,9h이접근정상배양조수평.OGD배양후,원대대서성형효질세포EdU화PCNA양성세포솔축점증가,6h체최고수평,여상응시간점적정상배양조비교차이유통계학의의；이후하강,지9h여정상배양조비교차이무통계학의의.결론 OGD배양6h가성공모의체내결양결혈후성형효질세포증식개변,위진행결양결혈성뇌손상후성형효질세포과도증식적상관연구제공료은정가고적체외실험모형화이론의거.
