军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2013年
8期
587-590
,共4页
刘子中%张义全%周冬生%杨瑞馥%韩延平
劉子中%張義全%週鼕生%楊瑞馥%韓延平
류자중%장의전%주동생%양서복%한연평
田鼠型鼠疫耶尔森菌%转录调控%温度%酸度%psa位点
田鼠型鼠疫耶爾森菌%轉錄調控%溫度%痠度%psa位點
전서형서역야이삼균%전록조공%온도%산도%psa위점
Yersinia pestis biovar.microtus%transcriptional regulation%temperature%acidity%psa locus
目的 研究温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控作用.方法 首先设计相关跨基因引物,用RT-PCR方法验证sa位点的相关操纵子结构.扩增操纵子首基因上游启动子区500 nt序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,将重组质粒转入鼠疫菌中,通过测定β-半乳糖苷酶活性差异来判断不同温度(26和37℃)和酸度(pH 6.0和pH 8.0)对psaE和psaA的调控关系.最后提取鼠疫菌在上述不同温度和酸度条件下的总RNA,采用引物延伸实验进一步明确温度和酸度对psaA的调控关系.结果与结论 RT-PCR结果证实了田鼠型鼠疫菌的psa位点由操纵子psaEF和psaABC构成；半乳糖苷酶和引物延伸实验结果显示在37℃、pH 6.0培养条件下psaABC的转录水平最高,而psaEF的转录水平无明显变化,提示psaA的表达水平在37C酸性条件下表达量最高,psaE则不受温度和酸度的调控.
目的 研究溫度和痠度對田鼠型鼠疫耶爾森菌psa位點的轉錄調控作用.方法 首先設計相關跨基因引物,用RT-PCR方法驗證sa位點的相關操縱子結構.擴增操縱子首基因上遊啟動子區500 nt序列,併剋隆入pRW50質粒β-半乳糖苷酶基因的上遊,將重組質粒轉入鼠疫菌中,通過測定β-半乳糖苷酶活性差異來判斷不同溫度(26和37℃)和痠度(pH 6.0和pH 8.0)對psaE和psaA的調控關繫.最後提取鼠疫菌在上述不同溫度和痠度條件下的總RNA,採用引物延伸實驗進一步明確溫度和痠度對psaA的調控關繫.結果與結論 RT-PCR結果證實瞭田鼠型鼠疫菌的psa位點由操縱子psaEF和psaABC構成；半乳糖苷酶和引物延伸實驗結果顯示在37℃、pH 6.0培養條件下psaABC的轉錄水平最高,而psaEF的轉錄水平無明顯變化,提示psaA的錶達水平在37C痠性條件下錶達量最高,psaE則不受溫度和痠度的調控.
목적 연구온도화산도대전서형서역야이삼균psa위점적전록조공작용.방법 수선설계상관과기인인물,용RT-PCR방법험증sa위점적상관조종자결구.확증조종자수기인상유계동자구500 nt서렬,병극륭입pRW50질립β-반유당감매기인적상유,장중조질립전입서역균중,통과측정β-반유당감매활성차이래판단불동온도(26화37℃)화산도(pH 6.0화pH 8.0)대psaE화psaA적조공관계.최후제취서역균재상술불동온도화산도조건하적총RNA,채용인물연신실험진일보명학온도화산도대psaA적조공관계.결과여결론 RT-PCR결과증실료전서형서역균적psa위점유조종자psaEF화psaABC구성；반유당감매화인물연신실험결과현시재37℃、pH 6.0배양조건하psaABC적전록수평최고,이psaEF적전록수평무명현변화,제시psaA적표체수평재37C산성조건하표체량최고,psaE칙불수온도화산도적조공.
