中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2012年
12期
1719-1723
,共5页
刘跃亮%罗进勇%张彦%何通川%曾照芳
劉躍亮%囉進勇%張彥%何通川%曾照芳
류약량%라진용%장언%하통천%증조방
双氢青蒿素%人骨肉瘤细胞%细胞增殖%细胞凋亡%Wnt信号通路%β-Catenin
雙氫青蒿素%人骨肉瘤細胞%細胞增殖%細胞凋亡%Wnt信號通路%β-Catenin
쌍경청호소%인골육류세포%세포증식%세포조망%Wnt신호통로%β-Catenin
目的 观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制.方法 体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响.Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态变化.构建β-Catenin荧光素酶报告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)检测DHA作用143B后细胞内β-Catenin活性变化.不同浓度的DHA作用后,Western blot检测与细胞增殖(如PCNA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相关的标志物蛋白质表达变化.结果 DHA作用于143B细胞24 h后,MTT结果显示143B细胞的增殖活性受到明显抑制,且其克隆形成能力减弱(P<0.05),在DHA浓度达35 μmol·L-1时,抑制效率最明显.Western blot结果显示PCNA表达下调;而促凋亡蛋白Bad和 Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达明显减弱.结论 双氢青蒿素具有较明显的抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能通过下调细胞增殖相关蛋白PCNA、Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,启动凋亡程序,致143B细胞发生凋亡.
目的 觀察雙氫青蒿素(dihydroarteminin,DHA)對人骨肉瘤細胞143B的增殖和凋亡的影響以及可能的機製.方法 體外培養人骨肉瘤細胞株143B;MTT比色法和剋隆形成實驗檢測不同濃度DHA對骨肉瘤細胞存活與剋隆形成能力的影響.Hoechst 33258染色法觀察細胞凋亡的形態變化.構建β-Catenin熒光素酶報告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)檢測DHA作用143B後細胞內β-Catenin活性變化.不同濃度的DHA作用後,Western blot檢測與細胞增殖(如PCNA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相關的標誌物蛋白質錶達變化.結果 DHA作用于143B細胞24 h後,MTT結果顯示143B細胞的增殖活性受到明顯抑製,且其剋隆形成能力減弱(P<0.05),在DHA濃度達35 μmol·L-1時,抑製效率最明顯.Western blot結果顯示PCNA錶達下調;而促凋亡蛋白Bad和 Caspase-3錶達上調,Bcl-2蛋白錶達明顯減弱.結論 雙氫青蒿素具有較明顯的抑製人骨肉瘤細胞的增殖且促進其凋亡的作用,可能通過下調細胞增殖相關蛋白PCNA、Bcl-2和上調促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,啟動凋亡程序,緻143B細胞髮生凋亡.
목적 관찰쌍경청호소(dihydroarteminin,DHA)대인골육류세포143B적증식화조망적영향이급가능적궤제.방법 체외배양인골육류세포주143B;MTT비색법화극륭형성실험검측불동농도DHA대골육류세포존활여극륭형성능력적영향.Hoechst 33258염색법관찰세포조망적형태변화.구건β-Catenin형광소매보고기인(β-Catenin-Luc,p-Top)검측DHA작용143B후세포내β-Catenin활성변화.불동농도적DHA작용후,Western blot검측여세포증식(여PCNA、Cyclin D1、c-Myc)、조망(여Bad、Bcl-2、Caspase-3)밀절상관적표지물단백질표체변화.결과 DHA작용우143B세포24 h후,MTT결과현시143B세포적증식활성수도명현억제,차기극륭형성능력감약(P<0.05),재DHA농도체35 μmol·L-1시,억제효솔최명현.Western blot결과현시PCNA표체하조;이촉조망단백Bad화 Caspase-3표체상조,Bcl-2단백표체명현감약.결론 쌍경청호소구유교명현적억제인골육류세포적증식차촉진기조망적작용,가능통과하조세포증식상관단백PCNA、Bcl-2화상조촉조망단백Bad화Caspase-3,계동조망정서,치143B세포발생조망.
