江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2013年
4期
727-731
,共5页
魏晓棠%李伟涛%陈宏%彭青%尼秀媚%白桦%张京宣
魏曉棠%李偉濤%陳宏%彭青%尼秀媚%白樺%張京宣
위효당%리위도%진굉%팽청%니수미%백화%장경선
番茄黑环病毒%外壳蛋白基因%克隆%原核表达
番茄黑環病毒%外殼蛋白基因%剋隆%原覈錶達
번가흑배병독%외각단백기인%극륭%원핵표체
tomato black ring virus%coat protein gene%cloning%prokaryotic expressing
利用RT-PCR方法获得了番茄黑环病毒(TBRV)外壳蛋白(coat protein,CP)基因,将CP基因克隆到pMD19-T Simple载体,并进行测序,大小为l 399 bp.与GenBank中已报道的TBRV的CP基因核苷酸相似度达99％以上.将TBRV CP基因定向插入双酶切的pET30a中,成功构建了原核表达载体pET30a-TBRVCP,转化大肠杆菌BL-21,表达重组蛋白.SDS-PAGE电泳分析发现,通过诱导条件的优化,重组蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG、4h条件下表达量最高.
利用RT-PCR方法穫得瞭番茄黑環病毒(TBRV)外殼蛋白(coat protein,CP)基因,將CP基因剋隆到pMD19-T Simple載體,併進行測序,大小為l 399 bp.與GenBank中已報道的TBRV的CP基因覈苷痠相似度達99％以上.將TBRV CP基因定嚮插入雙酶切的pET30a中,成功構建瞭原覈錶達載體pET30a-TBRVCP,轉化大腸桿菌BL-21,錶達重組蛋白.SDS-PAGE電泳分析髮現,通過誘導條件的優化,重組蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG、4h條件下錶達量最高.
이용RT-PCR방법획득료번가흑배병독(TBRV)외각단백(coat protein,CP)기인,장CP기인극륭도pMD19-T Simple재체,병진행측서,대소위l 399 bp.여GenBank중이보도적TBRV적CP기인핵감산상사도체99％이상.장TBRV CP기인정향삽입쌍매절적pET30a중,성공구건료원핵표체재체pET30a-TBRVCP,전화대장간균BL-21,표체중조단백.SDS-PAGE전영분석발현,통과유도조건적우화,중조단백재37℃,1.0 mmol/L IPTG、4h조건하표체량최고.
