重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
35期
3689-3691,3694
,共4页
肺肿瘤%抗药性%细胞凋亡%逆转剂%靶向治疗
肺腫瘤%抗藥性%細胞凋亡%逆轉劑%靶嚮治療
폐종류%항약성%세포조망%역전제%파향치료
目的 建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR,研究其耐药机制,探讨小白菊内酯(PAR)逆转A549/GR耐药的机制.方法 以吉非替尼为诱导剂,人肺腺癌细胞系A549为诱导对象,采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR.采用细胞毒实验(MTT)法测定细胞耐药指数,免疫印迹法(Western blotting)检测细胞耐药相关蛋白表达水平,进一步通过MTT法检测PAR对A549/GR的逆转倍数,Annexin V-FITC双标法检测PAR的促凋亡作用,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达水平.结果 所建立的人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR耐药指数为18.7.A549/GR细胞中MDR和ABCG2耐药相关蛋白表达水平较A549升高.MTT结果显示PAR对耐药细胞A549/GR的逆转倍数为8.66.Annexin V-FITC凋亡检测结果显示PAR能有效促进A549/GR细胞凋亡,Western blotting检测显示PAR能有效降低survivin、Bcl-2两种抑制凋亡相关蛋白的表达.结论 成功建立了人肺腺癌吉非替尼耐药细胞系A549/GR;PAR通过促进A549/GR细胞凋亡有效逆转其耐药.
目的 建立人肺腺癌吉非替尼耐藥細胞繫A549/GR,研究其耐藥機製,探討小白菊內酯(PAR)逆轉A549/GR耐藥的機製.方法 以吉非替尼為誘導劑,人肺腺癌細胞繫A549為誘導對象,採用大劑量遲擊和逐步增加劑量相結閤的方法,誘導建立人肺腺癌吉非替尼耐藥細胞繫A549/GR.採用細胞毒實驗(MTT)法測定細胞耐藥指數,免疫印跡法(Western blotting)檢測細胞耐藥相關蛋白錶達水平,進一步通過MTT法檢測PAR對A549/GR的逆轉倍數,Annexin V-FITC雙標法檢測PAR的促凋亡作用,Western blotting檢測細胞凋亡相關蛋白錶達水平.結果 所建立的人肺腺癌吉非替尼耐藥細胞繫A549/GR耐藥指數為18.7.A549/GR細胞中MDR和ABCG2耐藥相關蛋白錶達水平較A549升高.MTT結果顯示PAR對耐藥細胞A549/GR的逆轉倍數為8.66.Annexin V-FITC凋亡檢測結果顯示PAR能有效促進A549/GR細胞凋亡,Western blotting檢測顯示PAR能有效降低survivin、Bcl-2兩種抑製凋亡相關蛋白的錶達.結論 成功建立瞭人肺腺癌吉非替尼耐藥細胞繫A549/GR;PAR通過促進A549/GR細胞凋亡有效逆轉其耐藥.
목적 건립인폐선암길비체니내약세포계A549/GR,연구기내약궤제,탐토소백국내지(PAR)역전A549/GR내약적궤제.방법 이길비체니위유도제,인폐선암세포계A549위유도대상,채용대제량충격화축보증가제량상결합적방법,유도건립인폐선암길비체니내약세포계A549/GR.채용세포독실험(MTT)법측정세포내약지수,면역인적법(Western blotting)검측세포내약상관단백표체수평,진일보통과MTT법검측PAR대A549/GR적역전배수,Annexin V-FITC쌍표법검측PAR적촉조망작용,Western blotting검측세포조망상관단백표체수평.결과 소건립적인폐선암길비체니내약세포계A549/GR내약지수위18.7.A549/GR세포중MDR화ABCG2내약상관단백표체수평교A549승고.MTT결과현시PAR대내약세포A549/GR적역전배수위8.66.Annexin V-FITC조망검측결과현시PAR능유효촉진A549/GR세포조망,Western blotting검측현시PAR능유효강저survivin、Bcl-2량충억제조망상관단백적표체.결론 성공건립료인폐선암길비체니내약세포계A549/GR;PAR통과촉진A549/GR세포조망유효역전기내약.
