畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
67-70
,共4页
杨传定%魏建超%史子学%邵东华%王少辉%李蓓蓓%王雪敏%马志永
楊傳定%魏建超%史子學%邵東華%王少輝%李蓓蓓%王雪敏%馬誌永
양전정%위건초%사자학%소동화%왕소휘%리배배%왕설민%마지영
表皮生长因子%犬%基因克隆%序列分析
錶皮生長因子%犬%基因剋隆%序列分析
표피생장인자%견%기인극륭%서렬분석
为分析和比较不同品种犬的表皮生长因子(canine epidermal growth factor,cEGF)基因的分子特征及其差异,收集11个常见不同品种犬的血样,提取基因组,采用PCR方法分别扩增出编码cEGF的N端和C端结构域的犬32号染色体20和21号外显子,纯化后与pMDTM 18-T Vector连接构建重组子并转化大肠杆菌DH5α感受态,PCR鉴定阳性克隆后送样测序,用20和21号外显子序列拼接出cEGF全长,采用BLAST和DNAStar软件分析序列相互关系特征.结果:成功扩增出11种不同品种犬EGF编码基因,全长为156 bp,编码52个氨基酸,犬EGF基因序列同源性在97.4％～100％之间.根据cEGF编码基因推导氨基酸序列同源性为98.1％～100％,除了杜宾犬(Doberman Pinscher)EGF氨基酸在52位点处R→F,其余的氨基酸序列都一致.cEGF氨基酸序列与几种其他动物及人EGF相比较发现:cEGF与家猫EGF(Felis catus EGF)同源性很高,达到94.2％.表明不同品种犬的EGF编码基因有很高的同源性且非常保守,并与家猫EGF也有很高的同源性.
為分析和比較不同品種犬的錶皮生長因子(canine epidermal growth factor,cEGF)基因的分子特徵及其差異,收集11箇常見不同品種犬的血樣,提取基因組,採用PCR方法分彆擴增齣編碼cEGF的N耑和C耑結構域的犬32號染色體20和21號外顯子,純化後與pMDTM 18-T Vector連接構建重組子併轉化大腸桿菌DH5α感受態,PCR鑒定暘性剋隆後送樣測序,用20和21號外顯子序列拼接齣cEGF全長,採用BLAST和DNAStar軟件分析序列相互關繫特徵.結果:成功擴增齣11種不同品種犬EGF編碼基因,全長為156 bp,編碼52箇氨基痠,犬EGF基因序列同源性在97.4％～100％之間.根據cEGF編碼基因推導氨基痠序列同源性為98.1％～100％,除瞭杜賓犬(Doberman Pinscher)EGF氨基痠在52位點處R→F,其餘的氨基痠序列都一緻.cEGF氨基痠序列與幾種其他動物及人EGF相比較髮現:cEGF與傢貓EGF(Felis catus EGF)同源性很高,達到94.2％.錶明不同品種犬的EGF編碼基因有很高的同源性且非常保守,併與傢貓EGF也有很高的同源性.
위분석화비교불동품충견적표피생장인자(canine epidermal growth factor,cEGF)기인적분자특정급기차이,수집11개상견불동품충견적혈양,제취기인조,채용PCR방법분별확증출편마cEGF적N단화C단결구역적견32호염색체20화21호외현자,순화후여pMDTM 18-T Vector련접구건중조자병전화대장간균DH5α감수태,PCR감정양성극륭후송양측서,용20화21호외현자서렬병접출cEGF전장,채용BLAST화DNAStar연건분석서렬상호관계특정.결과:성공확증출11충불동품충견EGF편마기인,전장위156 bp,편마52개안기산,견EGF기인서렬동원성재97.4％～100％지간.근거cEGF편마기인추도안기산서렬동원성위98.1％～100％,제료두빈견(Doberman Pinscher)EGF안기산재52위점처R→F,기여적안기산서렬도일치.cEGF안기산서렬여궤충기타동물급인EGF상비교발현:cEGF여가묘EGF(Felis catus EGF)동원성흔고,체도94.2％.표명불동품충견적EGF편마기인유흔고적동원성차비상보수,병여가묘EGF야유흔고적동원성.
