中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2014年
4期
80-84
,共5页
吴斌%张秀云%屈菲%郑勇%苏旺
吳斌%張秀雲%屈菲%鄭勇%囌旺
오빈%장수운%굴비%정용%소왕
高致病性猪蓝耳病%免疫胶体金%试纸条
高緻病性豬藍耳病%免疫膠體金%試紙條
고치병성저람이병%면역효체금%시지조
本试验利用柠檬酸三钠还原法制备粒径约为40 nm的胶体金,在玻璃纤维和硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷上胶体金PRRSV多克隆抗体、HP-PRRSV单克隆抗体和羊抗鼠IgG二抗.本试验组装的免疫胶体金诊断试纸条具备良好的敏感性和较高的特异性,最低病毒检测限为100TCID50;只对高致病性猪蓝耳病呈阳性反应,对PRRSV (ATCC VR2332)有弱反应,对猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒均无反应.重复性试验表明,所研制的试纸条结果重复性较强,4℃条件下至少可保存半年.应用该试纸条对60份临床样品检测,同时与高致病性蓝耳病RT—PCR诊断试剂盒的方法进行符合性比较验证,结果显示两种方法检测结果的符合率达91％ (10/11),证明本研究制备的高致病性猪蓝耳病抗原免疫金标试纸条是快速便捷的检测高致病性猪蓝耳病的新型检测技术.
本試驗利用檸檬痠三鈉還原法製備粒徑約為40 nm的膠體金,在玻璃纖維和硝痠纖維素膜的檢測線和質控線上分彆噴上膠體金PRRSV多剋隆抗體、HP-PRRSV單剋隆抗體和羊抗鼠IgG二抗.本試驗組裝的免疫膠體金診斷試紙條具備良好的敏感性和較高的特異性,最低病毒檢測限為100TCID50;隻對高緻病性豬藍耳病呈暘性反應,對PRRSV (ATCC VR2332)有弱反應,對豬瘟病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬偽狂犬病毒、豬圓環病毒均無反應.重複性試驗錶明,所研製的試紙條結果重複性較彊,4℃條件下至少可保存半年.應用該試紙條對60份臨床樣品檢測,同時與高緻病性藍耳病RT—PCR診斷試劑盒的方法進行符閤性比較驗證,結果顯示兩種方法檢測結果的符閤率達91％ (10/11),證明本研究製備的高緻病性豬藍耳病抗原免疫金標試紙條是快速便捷的檢測高緻病性豬藍耳病的新型檢測技術.
본시험이용저몽산삼납환원법제비립경약위40 nm적효체금,재파리섬유화초산섬유소막적검측선화질공선상분별분상효체금PRRSV다극륭항체、HP-PRRSV단극륭항체화양항서IgG이항.본시험조장적면역효체금진단시지조구비량호적민감성화교고적특이성,최저병독검측한위100TCID50;지대고치병성저람이병정양성반응,대PRRSV (ATCC VR2332)유약반응,대저온병독、저전염성위장염병독、저위광견병독、저원배병독균무반응.중복성시험표명,소연제적시지조결과중복성교강,4℃조건하지소가보존반년.응용해시지조대60빈림상양품검측,동시여고치병성람이병RT—PCR진단시제합적방법진행부합성비교험증,결과현시량충방법검측결과적부합솔체91％ (10/11),증명본연구제비적고치병성저람이병항원면역금표시지조시쾌속편첩적검측고치병성저람이병적신형검측기술.
