中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2014年
5期
489-493
,共5页
王海霞%孙燕妮%王甦民%赵亭%平国玲%张力平
王海霞%孫燕妮%王甦民%趙亭%平國玲%張力平
왕해하%손연니%왕소민%조정%평국령%장력평
结核分枝杆菌%表位肽%CD8+CTL%特异性杀伤活性
結覈分枝桿菌%錶位肽%CD8+CTL%特異性殺傷活性
결핵분지간균%표위태%CD8+CTL%특이성살상활성
Mycobacterium tuberculosis%epitope peptides%CD8 + cytotoxic T-lymphocytes%specific cytotoxicity
目的 体外鉴定结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0440蛋白序列中表位肽362 370 aa和369-377 aa的HLA A*0201限制性CD8+ CTL表位的免疫原性,为基于表位的结核疫苗研究提供实验依据.方法 根据T2细胞HLA-A* 0201分子与多肽结合力分析实验结果,选取结核分枝杆菌Rv0440蛋白质氨基酸序列中对HLA-A* 0201分子高亲合力的Rv0440 1(362-370 aa,KLQERLAKL)和Rv0440-2(369 377 aa,KLAGGVAVI)作为候选表位肽.用候选表位肽刺激PPD(+++)健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)检测细胞分泌IFN γ的水平.用候选表位肽诱导特异性CTL细胞,检测特异性CTL细胞对负载表位肽的T2细胞的杀伤活性,观察Rv0440-1和Rv0440 2的HLA-A* 0201限制性CD8+ CTL表位的免疫原性.结果 ELISPOT实验结果显示,表位肽Rv0440-1能够明显诱导HLA-A* 0201(+)、PPD(+++)健康志愿者PBMC分泌IFN γ(P＜0.05);且表位肽Rv0440-1负载DC诱导的CTL在效靶比为10:1时对负载相应表位肽的T2细胞的特异性杀伤活性高于对照组(P＜0.05);与对照组相比,表位肽Rv0440 2没有诱导能力.结论 表位肽Rv0440-1(362-370 aa,KLQERLAKL)具有良好的免疫原性,是有效的结核分枝杆菌的HLA-A*0201限制性CTL表位.
目的 體外鑒定結覈分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0440蛋白序列中錶位肽362 370 aa和369-377 aa的HLA A*0201限製性CD8+ CTL錶位的免疫原性,為基于錶位的結覈疫苗研究提供實驗依據.方法 根據T2細胞HLA-A* 0201分子與多肽結閤力分析實驗結果,選取結覈分枝桿菌Rv0440蛋白質氨基痠序列中對HLA-A* 0201分子高親閤力的Rv0440 1(362-370 aa,KLQERLAKL)和Rv0440-2(369 377 aa,KLAGGVAVI)作為候選錶位肽.用候選錶位肽刺激PPD(+++)健康誌願者外週血單箇覈細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)檢測細胞分泌IFN γ的水平.用候選錶位肽誘導特異性CTL細胞,檢測特異性CTL細胞對負載錶位肽的T2細胞的殺傷活性,觀察Rv0440-1和Rv0440 2的HLA-A* 0201限製性CD8+ CTL錶位的免疫原性.結果 ELISPOT實驗結果顯示,錶位肽Rv0440-1能夠明顯誘導HLA-A* 0201(+)、PPD(+++)健康誌願者PBMC分泌IFN γ(P＜0.05);且錶位肽Rv0440-1負載DC誘導的CTL在效靶比為10:1時對負載相應錶位肽的T2細胞的特異性殺傷活性高于對照組(P＜0.05);與對照組相比,錶位肽Rv0440 2沒有誘導能力.結論 錶位肽Rv0440-1(362-370 aa,KLQERLAKL)具有良好的免疫原性,是有效的結覈分枝桿菌的HLA-A*0201限製性CTL錶位.
목적 체외감정결핵분지간균(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv0440단백서렬중표위태362 370 aa화369-377 aa적HLA A*0201한제성CD8+ CTL표위적면역원성,위기우표위적결핵역묘연구제공실험의거.방법 근거T2세포HLA-A* 0201분자여다태결합력분석실험결과,선취결핵분지간균Rv0440단백질안기산서렬중대HLA-A* 0201분자고친합력적Rv0440 1(362-370 aa,KLQERLAKL)화Rv0440-2(369 377 aa,KLAGGVAVI)작위후선표위태.용후선표위태자격PPD(+++)건강지원자외주혈단개핵세포(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)검측세포분비IFN γ적수평.용후선표위태유도특이성CTL세포,검측특이성CTL세포대부재표위태적T2세포적살상활성,관찰Rv0440-1화Rv0440 2적HLA-A* 0201한제성CD8+ CTL표위적면역원성.결과 ELISPOT실험결과현시,표위태Rv0440-1능구명현유도HLA-A* 0201(+)、PPD(+++)건강지원자PBMC분비IFN γ(P＜0.05);차표위태Rv0440-1부재DC유도적CTL재효파비위10:1시대부재상응표위태적T2세포적특이성살상활성고우대조조(P＜0.05);여대조조상비,표위태Rv0440 2몰유유도능력.결론 표위태Rv0440-1(362-370 aa,KLQERLAKL)구유량호적면역원성,시유효적결핵분지간균적HLA-A*0201한제성CTL표위.
