中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2014年
5期
458-463
,共6页
王慧勤%李跃峰%李志强%温书香%陈鹏博%赵庆亮%纪太旺%曹旭东%陈创夫
王慧勤%李躍峰%李誌彊%溫書香%陳鵬博%趙慶亮%紀太旺%曹旭東%陳創伕
왕혜근%리약봉%리지강%온서향%진붕박%조경량%기태왕%조욱동%진창부
结核分枝杆菌%ESAT6%CFP10%DNA疫苗%卡介苗
結覈分枝桿菌%ESAT6%CFP10%DNA疫苗%卡介苗
결핵분지간균%ESAT6%CFP10%DNA역묘%잡개묘
Mycobacterium tuberculosis%ESAT6%CFP10%DNA vaccine%BCG
目的 研究ESAT6、CFP10基因DNA疫苗分别与卡介苗联合免疫小鼠,以诱导免疫效果.方法 以构建的真核表达载体pEGFP-N1ESAT6、pEGFP-N1-CFP10与卡介苗共同免疫随机分成8组的80只小鼠,分别标记为:生理盐水组(SLYS)、卡介苗组(KJM)、pEGFP N1组(P-N1)、pEGFP-N1 ESAT6组(P-N1-E)、pEGFP N1-CFP10组(P-N1-C)、卡介苗加pEGFP-N1组(K+P-N1)、卡介苗加pEGFP-N1-ESAT6组(K+P-N1-E)和卡介苗加pEGFP-N1 CFP10组(K+P-N1-C).每只小鼠皮内注射100μL卡介苗,每只小鼠肌肉注射50μg质粒,每组共注射3次.以纯化的ESAT6、CFP10蛋白作为抗原,用DOT ELISA方法检测小鼠血清中的抗体;用ELISA方法检测小鼠血清中IFN-γ的变化.结果 免疫3次后的小鼠血清中检测到针对CFP10蛋白的抗体,未检测到针对ESAT6蛋白的抗体.但二者血清中IFNγ水平都有显著上升,K+P N1-C和K+P-N1-E免疫3次后,测得的IFN-γ平均含量为(107.591±7.3281)pg/mL和(95.7503±9.0184) pg/mL,显著高于免前、一免、二免(P＜0.01).结论 结核分枝杆菌ESAT6,CFP10基因DNA疫苗和卡介苗联合应用后可诱导小鼠产生有效的细胞免疫应答,为DNA疫苗的研究奠定一定的基础.
目的 研究ESAT6、CFP10基因DNA疫苗分彆與卡介苗聯閤免疫小鼠,以誘導免疫效果.方法 以構建的真覈錶達載體pEGFP-N1ESAT6、pEGFP-N1-CFP10與卡介苗共同免疫隨機分成8組的80隻小鼠,分彆標記為:生理鹽水組(SLYS)、卡介苗組(KJM)、pEGFP N1組(P-N1)、pEGFP-N1 ESAT6組(P-N1-E)、pEGFP N1-CFP10組(P-N1-C)、卡介苗加pEGFP-N1組(K+P-N1)、卡介苗加pEGFP-N1-ESAT6組(K+P-N1-E)和卡介苗加pEGFP-N1 CFP10組(K+P-N1-C).每隻小鼠皮內註射100μL卡介苗,每隻小鼠肌肉註射50μg質粒,每組共註射3次.以純化的ESAT6、CFP10蛋白作為抗原,用DOT ELISA方法檢測小鼠血清中的抗體;用ELISA方法檢測小鼠血清中IFN-γ的變化.結果 免疫3次後的小鼠血清中檢測到針對CFP10蛋白的抗體,未檢測到針對ESAT6蛋白的抗體.但二者血清中IFNγ水平都有顯著上升,K+P N1-C和K+P-N1-E免疫3次後,測得的IFN-γ平均含量為(107.591±7.3281)pg/mL和(95.7503±9.0184) pg/mL,顯著高于免前、一免、二免(P＜0.01).結論 結覈分枝桿菌ESAT6,CFP10基因DNA疫苗和卡介苗聯閤應用後可誘導小鼠產生有效的細胞免疫應答,為DNA疫苗的研究奠定一定的基礎.
목적 연구ESAT6、CFP10기인DNA역묘분별여잡개묘연합면역소서,이유도면역효과.방법 이구건적진핵표체재체pEGFP-N1ESAT6、pEGFP-N1-CFP10여잡개묘공동면역수궤분성8조적80지소서,분별표기위:생리염수조(SLYS)、잡개묘조(KJM)、pEGFP N1조(P-N1)、pEGFP-N1 ESAT6조(P-N1-E)、pEGFP N1-CFP10조(P-N1-C)、잡개묘가pEGFP-N1조(K+P-N1)、잡개묘가pEGFP-N1-ESAT6조(K+P-N1-E)화잡개묘가pEGFP-N1 CFP10조(K+P-N1-C).매지소서피내주사100μL잡개묘,매지소서기육주사50μg질립,매조공주사3차.이순화적ESAT6、CFP10단백작위항원,용DOT ELISA방법검측소서혈청중적항체;용ELISA방법검측소서혈청중IFN-γ적변화.결과 면역3차후적소서혈청중검측도침대CFP10단백적항체,미검측도침대ESAT6단백적항체.단이자혈청중IFNγ수평도유현저상승,K+P N1-C화K+P-N1-E면역3차후,측득적IFN-γ평균함량위(107.591±7.3281)pg/mL화(95.7503±9.0184) pg/mL,현저고우면전、일면、이면(P＜0.01).결론 결핵분지간균ESAT6,CFP10기인DNA역묘화잡개묘연합응용후가유도소서산생유효적세포면역응답,위DNA역묘적연구전정일정적기출.
