中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2014年
5期
444-447
,共4页
张硕%芜为%张全福%李川%梁米芳%李德新
張碩%蕪為%張全福%李川%樑米芳%李德新
장석%무위%장전복%리천%량미방%리덕신
Heartland病毒%荧光微球%血清学诊断
Heartland病毒%熒光微毬%血清學診斷
Heartland병독%형광미구%혈청학진단
Heartland virus%fluorescent microsphere%serological diagnosis
目的 初步建立Heartland病毒血清学诊断方法.方法 利用原核表达系统及杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达并纯化Heartland病毒核蛋白(Nucleocapsid protein,NP),通过间接免疫荧光法、间接ELISA法及基于Luminex技术的荧光微球法建立Heartland病毒核蛋白IgG抗体血清学检测方法,并利用原核系统表达纯化的Heartland NP所制备的兔免疫血清进行评价.结果 原核及真核两系统纯化后的Heartland病毒核蛋白经SDS-PAGE鉴定,均呈现单一蛋白条带,相对分子量约为25 kDa.Heartland NP兔免疫血清经间接免疫荧光检测,其IgG抗体滴度可达1:6 400;经间接ELISA法检测可达1∶409 600以上,经Luminex荧光微球法检测可达1∶4 096 000.上述3种方法检测EV 71 VP1兔免疫血清,均无明显非特异性反应.结论 本研究初步建立了3种Heartland病毒血清学诊断方法,需进一步完善以应用于实验室诊断.
目的 初步建立Heartland病毒血清學診斷方法.方法 利用原覈錶達繫統及桿狀病毒-昆蟲細胞錶達繫統錶達併純化Heartland病毒覈蛋白(Nucleocapsid protein,NP),通過間接免疫熒光法、間接ELISA法及基于Luminex技術的熒光微毬法建立Heartland病毒覈蛋白IgG抗體血清學檢測方法,併利用原覈繫統錶達純化的Heartland NP所製備的兔免疫血清進行評價.結果 原覈及真覈兩繫統純化後的Heartland病毒覈蛋白經SDS-PAGE鑒定,均呈現單一蛋白條帶,相對分子量約為25 kDa.Heartland NP兔免疫血清經間接免疫熒光檢測,其IgG抗體滴度可達1:6 400;經間接ELISA法檢測可達1∶409 600以上,經Luminex熒光微毬法檢測可達1∶4 096 000.上述3種方法檢測EV 71 VP1兔免疫血清,均無明顯非特異性反應.結論 本研究初步建立瞭3種Heartland病毒血清學診斷方法,需進一步完善以應用于實驗室診斷.
목적 초보건립Heartland병독혈청학진단방법.방법 이용원핵표체계통급간상병독-곤충세포표체계통표체병순화Heartland병독핵단백(Nucleocapsid protein,NP),통과간접면역형광법、간접ELISA법급기우Luminex기술적형광미구법건립Heartland병독핵단백IgG항체혈청학검측방법,병이용원핵계통표체순화적Heartland NP소제비적토면역혈청진행평개.결과 원핵급진핵량계통순화후적Heartland병독핵단백경SDS-PAGE감정,균정현단일단백조대,상대분자량약위25 kDa.Heartland NP토면역혈청경간접면역형광검측,기IgG항체적도가체1:6 400;경간접ELISA법검측가체1∶409 600이상,경Luminex형광미구법검측가체1∶4 096 000.상술3충방법검측EV 71 VP1토면역혈청,균무명현비특이성반응.결론 본연구초보건립료3충Heartland병독혈청학진단방법,수진일보완선이응용우실험실진단.
