中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
1期
160-165
,共6页
陈继德%徐芬芬%朱恒%李喜梅%唐博%刘元林%张毅
陳繼德%徐芬芬%硃恆%李喜梅%唐博%劉元林%張毅
진계덕%서분분%주항%리희매%당박%류원림%장의
细胞间粘附分子1%MAPK通路%间充质干细胞%脂肪细胞
細胞間粘附分子1%MAPK通路%間充質榦細胞%脂肪細胞
세포간점부분자1%MAPK통로%간충질간세포%지방세포
intercellular cell adhesion molecule-1%MAPK pathway%mesenchymal stem cell%adipocyte
本研究旨在探讨细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)调节小鼠间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)向脂肪细胞分化的分子机制.分别将小鼠ICAM-1重组逆转录病毒MIGR1-ICAM-1和空载体逆转录病毒MIGR1感染小鼠间充质干细胞系C3H10T 1/2细胞,获得稳定高表达ICAM-1的C3H10T 1/2细胞(MIGR1-ICAM-1/MSC)和对照组细胞(MIGR1/MSC).通过Western blot检测P38,ERK和JNK通路的活化情况,观察MIGR1-ICAM-1/MSC和MIGR1/MSC向脂肪细胞的诱导分化.实验组加入P38、ERK及JNK 3种信号通路抑制剂后进行培养并观察其成脂肪分化情况.以原位油红染色观察脂滴,应用real-time PCR检测成脂分化关键转录因子C/EBPα和PPARγmRNA的表达水平.结果显示,ICAM-1过表达可活化MSC的P38、ERK及JNK通路;原位油红染色及real-time PCR检测结果显示对ERK通路活化抑制可导致MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγ的mRNA表达水平上调,脂滴变大,脂肪数量增加(P＜0.01);阻断P38通路后MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγ mRNA表达水平下调,脂滴及脂肪细胞数量更小、更少(P＜0.01).结论:ICAM-1可能通过活化ERK信号通路抑制MSC的成脂分化,通过活化P38通路维持小鼠MSC成脂分化能力.
本研究旨在探討細胞間黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)調節小鼠間充質榦細胞(mesenchymal stem cell,MSC)嚮脂肪細胞分化的分子機製.分彆將小鼠ICAM-1重組逆轉錄病毒MIGR1-ICAM-1和空載體逆轉錄病毒MIGR1感染小鼠間充質榦細胞繫C3H10T 1/2細胞,穫得穩定高錶達ICAM-1的C3H10T 1/2細胞(MIGR1-ICAM-1/MSC)和對照組細胞(MIGR1/MSC).通過Western blot檢測P38,ERK和JNK通路的活化情況,觀察MIGR1-ICAM-1/MSC和MIGR1/MSC嚮脂肪細胞的誘導分化.實驗組加入P38、ERK及JNK 3種信號通路抑製劑後進行培養併觀察其成脂肪分化情況.以原位油紅染色觀察脂滴,應用real-time PCR檢測成脂分化關鍵轉錄因子C/EBPα和PPARγmRNA的錶達水平.結果顯示,ICAM-1過錶達可活化MSC的P38、ERK及JNK通路;原位油紅染色及real-time PCR檢測結果顯示對ERK通路活化抑製可導緻MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγ的mRNA錶達水平上調,脂滴變大,脂肪數量增加(P＜0.01);阻斷P38通路後MIGR1-ICAM-1/MSC的C/EBPα和PPARγ mRNA錶達水平下調,脂滴及脂肪細胞數量更小、更少(P＜0.01).結論:ICAM-1可能通過活化ERK信號通路抑製MSC的成脂分化,通過活化P38通路維持小鼠MSC成脂分化能力.
본연구지재탐토세포간점부분자-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)조절소서간충질간세포(mesenchymal stem cell,MSC)향지방세포분화적분자궤제.분별장소서ICAM-1중조역전록병독MIGR1-ICAM-1화공재체역전록병독MIGR1감염소서간충질간세포계C3H10T 1/2세포,획득은정고표체ICAM-1적C3H10T 1/2세포(MIGR1-ICAM-1/MSC)화대조조세포(MIGR1/MSC).통과Western blot검측P38,ERK화JNK통로적활화정황,관찰MIGR1-ICAM-1/MSC화MIGR1/MSC향지방세포적유도분화.실험조가입P38、ERK급JNK 3충신호통로억제제후진행배양병관찰기성지방분화정황.이원위유홍염색관찰지적,응용real-time PCR검측성지분화관건전록인자C/EBPα화PPARγmRNA적표체수평.결과현시,ICAM-1과표체가활화MSC적P38、ERK급JNK통로;원위유홍염색급real-time PCR검측결과현시대ERK통로활화억제가도치MIGR1-ICAM-1/MSC적C/EBPα화PPARγ적mRNA표체수평상조,지적변대,지방수량증가(P＜0.01);조단P38통로후MIGR1-ICAM-1/MSC적C/EBPα화PPARγ mRNA표체수평하조,지적급지방세포수량경소、경소(P＜0.01).결론:ICAM-1가능통과활화ERK신호통로억제MSC적성지분화,통과활화P38통로유지소서MSC성지분화능력.
