CAJ | 학술논문

本研究探讨植物血凝素(PHA)诱导的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与传统方法制备的CIK细胞的体外增殖能力、效应细胞含量和对K562细胞杀伤活性影响并分析其差异.分离健康人外周血单个核细胞(PBMNC),分甲、乙两组,其中甲组用传统培养方法从PBMNC制备的传统CIK细胞,乙组采用PHA诱导单个核细胞制备获得的新型CIK细胞.在培养过程中,每3d统计各组细胞培养体系中细胞活率和细胞绝对值,并在培养至第15天时,用流式细胞仪分别检测两组细胞免疫表型,统计CD3+ CD56+、CD3+ CD8+和CD3+ CD4+细胞占各培养体系总细胞数的比例;同时用CCK-8试剂盒分别检测两组细胞在不同效靶比时对K562细胞的杀伤活性.结果表明:采用PHA诱导制备新型CIK细胞的方法比传统方法更能促进细胞增殖(P＜0.05),且细胞活率都保持在90％以上.两组CD3+ CD8+、CD3+ CD56+细胞比例都显著升高.与传统方法比,新方法的CD3+ CD8+细胞升高比例存在显著差异(P＜0.05),CD3+ CD56+细胞提升比例不存在差异,同时CD3+ CD4+下降的比例也不存在差异.效靶比为5:1、10:1、20:1、40:1时,PHA诱导制备的新型CIK细胞比传统方法制备的CIK细胞对K562细胞的杀伤活性更强(P＜0.05),且随着效靶比的升高两种效应细胞对K562细胞的杀伤活力的差异明显性也增加.结论:与传统方法相比,PHA可明显提高CIK细胞的增殖能力,调高CD3+ CD8+细胞的比例,增强CIK细胞对K562细胞的杀伤活性,这为白血病及其他肿瘤的细胞免疫治疗提供一种新来源的CIK细胞和可靠依据.
본연구탐토식물혈응소(PHA)유도적세포인자유도적살상세포(CIK)여전통방법제비적CIK세포적체외증식능력、효응세포함량화대K562세포살상활성영향병분석기차이.분리건강인외주혈단개핵세포(PBMNC),분갑、을량조,기중갑조용전통배양방법종PBMNC제비적전통CIK세포,을조채용PHA유도단개핵세포제비획득적신형CIK세포.재배양과정중,매3d통계각조세포배양체계중세포활솔화세포절대치,병재배양지제15천시,용류식세포의분별검측량조세포면역표형,통계CD3+ CD56+、CD3+ CD8+화CD3+ CD4+세포점각배양체계총세포수적비례;동시용CCK-8시제합분별검측량조세포재불동효파비시대K562세포적살상활성.결과표명:채용PHA유도제비신형CIK세포적방법비전통방법경능촉진세포증식(P＜0.05),차세포활솔도보지재90％이상.량조CD3+ CD8+、CD3+ CD56+세포비례도현저승고.여전통방법비,신방법적CD3+ CD8+세포승고비례존재현저차이(P＜0.05),CD3+ CD56+세포제승비례불존재차이,동시CD3+ CD4+하강적비례야불존재차이.효파비위5:1、10:1、20:1、40:1시,PHA유도제비적신형CIK세포비전통방법제비적CIK세포대K562세포적살상활성경강(P＜0.05),차수착효파비적승고량충효응세포대K562세포적살상활력적차이명현성야증가.결론:여전통방법상비,PHA가명현제고CIK세포적증식능력,조고CD3+ CD8+세포적비례,증강CIK세포대K562세포적살상활성,저위백혈병급기타종류적세포면역치료제공일충신래원적CIK세포화가고의거.