CAJ | 학술논문

本研究通过对急性白血病病人及体外肿瘤细胞株的DNA甲基化及基因表达的实验,探讨死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)基因在急性白血病中的表达情况及其启动子区域甲基化的状态,并分析两者之间的相关程度.应用RT-PCR检测DAPK基因在白血病细胞及正常骨髓细胞中的表达;用巢式甲基化特异性PCR(n-MSP)法检测急性白血病患者及细胞株DAPK基因启动子甲基化状况;从第二轮巢式MSP扩增出的随机产物中挑选2个随机引物,交予专业机构克隆后进行序列分析.结果表明:DAPK基因在10例正常对照者骨髓标本中均有表达,DAPKmRNA在急性白血病病人骨髓标本中表达平均值为0.61 ±0.40,低于正常对照者,差异有显著性(P＜0.05),其中52.94％(9/17例)的急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本DAPKmRNA表达降低或缺失,急性髓系白血病病人数据为41.18％ (42/102);细胞株U-937显示基因表达正常,HL-60表达缺失;102例急性髓系白血病病人骨髓标本中33例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为32.4％(33/102);17例急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本中8例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为47％ (8/17);7例正常人骨髓标本DAPK启动子区均为非甲基化;细胞株U-937 DAPK启动子区非甲基化,HL-60 DAPK启动子区甲基化.ALL组与AML组患者骨髓细胞DAPKmRNA表达与其启动子甲基化均呈显著负相关(ALL组r=-0.855,P＜0.05;AML组r=-0.343,P＜0.05),提示两者有密切的关联.结论:急性白血病患者中DAPK基因启动区甲基化与其mRNA的异常表达或失表达有关.
본연구통과대급성백혈병병인급체외종류세포주적DNA갑기화급기인표체적실험,탐토사망상관단백격매(death-associated protein kinase,DAPK)기인재급성백혈병중적표체정황급기계동자구역갑기화적상태,병분석량자지간적상관정도.응용RT-PCR검측DAPK기인재백혈병세포급정상골수세포중적표체;용소식갑기화특이성PCR(n-MSP)법검측급성백혈병환자급세포주DAPK기인계동자갑기화상황;종제이륜소식MSP확증출적수궤산물중도선2개수궤인물,교여전업궤구극륭후진행서렬분석.결과표명:DAPK기인재10례정상대조자골수표본중균유표체,DAPKmRNA재급성백혈병병인골수표본중표체평균치위0.61 ±0.40,저우정상대조자,차이유현저성(P＜0.05),기중52.94％(9/17례)적급성림파세포백혈병병인골수표본DAPKmRNA표체강저혹결실,급성수계백혈병병인수거위41.18％ (42/102);세포주U-937현시기인표체정상,HL-60표체결실;102례급성수계백혈병병인골수표본중33례존재DAPK계동자구갑기화,갑기화솔위32.4％(33/102);17례급성림파세포백혈병병인골수표본중8례존재DAPK계동자구갑기화,갑기화솔위47％ (8/17);7례정상인골수표본DAPK계동자구균위비갑기화;세포주U-937 DAPK계동자구비갑기화,HL-60 DAPK계동자구갑기화.ALL조여AML조환자골수세포DAPKmRNA표체여기계동자갑기화균정현저부상관(ALL조r=-0.855,P＜0.05;AML조r=-0.343,P＜0.05),제시량자유밀절적관련.결론:급성백혈병환자중DAPK기인계동구갑기화여기mRNA적이상표체혹실표체유관.