CAJ | 학술논문

本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率.通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法.通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性.结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致.ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103 copies/m1-109copies/ml,其灵敏度为0.01％,而当突变体含量低于10％时采用直接测序则检测不出突变.结论:本研究建立了一种可以检测NPM14种高频突变的ARMS-PCR方法.该方法灵敏度高,可以检出95％以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法.
본연구지재건립일충간단、령민적,능검측다충NPM1돌변체적방법,이강저NPM1돌변적루검솔.통과구건NPM1기인야생형화최상견적돌변형A、B、C、D중조질립작위검측대상,근거NPM1불동돌변체감기배렬방식불동,설계1대특이성인물,사득상유인물3'말단적감기여돌변체A、B、C、D필배,이여야생형NPM불필배;통과조건우화,건립검측다충NPM1돌변적ARMS-PCR적방법.통과대해방법적검측범위、령민도적평고급여직접측서법적비교,판단해방법적가행성.결과표명,성공구건NPM1기인야생형화돌변형A、B、C、D5충중조질립,경측서감정화목적편단일치.ARMS-PCR방법가이검측도ABCD 4충돌변체,검측범위재103 copies/m1-109copies/ml,기령민도위0.01％,이당돌변체함량저우10％시채용직접측서칙검측불출돌변.결론:본연구건립료일충가이검측NPM14충고빈돌변적ARMS-PCR방법.해방법령민도고,가이검출95％이상적돌변,위림상검측NPM1기인돌변제공일충신형적검측방법.