大豆科学
大豆科學
대두과학
SOYBEAN SCIENCE
2012年
6期
874-877
,共4页
张彦威%刘丽雪%赵琳%谷月娇%卢清瑶%宋仙萍%李文滨
張彥威%劉麗雪%趙琳%穀月嬌%盧清瑤%宋仙萍%李文濱
장언위%류려설%조림%곡월교%로청요%송선평%리문빈
大豆%SKIP%原核表达%包涵体%纯化
大豆%SKIP%原覈錶達%包涵體%純化
대두%SKIP%원핵표체%포함체%순화
将大豆中已克隆的一个新的SKIP基因(GmGBP1)构建到原核表达载体pGEX-6p-1上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,对其进行IPTG诱导.结果表明:在IPTG浓度为0.1 mmol·L-1,诱导时间为8h,诱导温度为37℃时,重组蛋白得到表达,分子量大约为95 kDa,SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,用8 mol·L-1尿素对其进行溶解后经GST柱纯化,得到较好的纯化效果.
將大豆中已剋隆的一箇新的SKIP基因(GmGBP1)構建到原覈錶達載體pGEX-6p-1上,導入大腸桿菌BL21(DE3)中,對其進行IPTG誘導.結果錶明:在IPTG濃度為0.1 mmol·L-1,誘導時間為8h,誘導溫度為37℃時,重組蛋白得到錶達,分子量大約為95 kDa,SDS-PAGE電泳結果錶明重組蛋白主要以包涵體形式存在,用8 mol·L-1尿素對其進行溶解後經GST柱純化,得到較好的純化效果.
장대두중이극륭적일개신적SKIP기인(GmGBP1)구건도원핵표체재체pGEX-6p-1상,도입대장간균BL21(DE3)중,대기진행IPTG유도.결과표명:재IPTG농도위0.1 mmol·L-1,유도시간위8h,유도온도위37℃시,중조단백득도표체,분자량대약위95 kDa,SDS-PAGE전영결과표명중조단백주요이포함체형식존재,용8 mol·L-1뇨소대기진행용해후경GST주순화,득도교호적순화효과.
