CAJ | 학술논문

戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的白道病毒性传染病.HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,其编码区由3个开放阅读框(ORF)组成,属戊型肝炎病毒科.HEV衣壳蛋白由ORF2编码.本研究根据编码HEV ORF2aa382～aa674的核苷酸序列克隆了p293基因,并将其克隆入原核表达载体pET28a,利用大肠杆菌BL21(DE3)对HEV衣壳蛋白截短体(p293)进行了表达.SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,在优化的表达条件下(1 mmoL/L IPTG,250 r/min,37℃,5h),重组蛋白p293能够在大肠杆菌内有效表达,目的蛋白约占总蛋白的66.15％.TEM检测结果显示,原核表达的p293能够在体外形成约30 ～40 nm的病毒样颗粒.免疫印迹和免疫荧光检测结果表明,p293与HEV标准阳性血清具有良好的反应原性和反应特异性.实验结果表明,p293可应用于HEV宿主吸附和病毒装配研究,为HEV的预防与诊断研究奠定了基础.
무형간염(HE)시유무형간염병독(HEV)감염인기적백도병독성전염병.HEV시일충무낭막적단고정련RNA병독,기편마구유3개개방열독광(ORF)조성,속무형간염병독과.HEV의각단백유ORF2편마.본연구근거편마HEV ORF2aa382～aa674적핵감산서렬극륭료p293기인,병장기극륭입원핵표체재체pET28a,이용대장간균BL21(DE3)대HEV의각단백절단체(p293)진행료표체.SDS-PAGE화Western blot검측결과표명,재우화적표체조건하(1 mmoL/L IPTG,250 r/min,37℃,5h),중조단백p293능구재대장간균내유효표체,목적단백약점총단백적66.15％.TEM검측결과현시,원핵표체적p293능구재체외형성약30 ～40 nm적병독양과립.면역인적화면역형광검측결과표명,p293여HEV표준양성혈청구유량호적반응원성화반응특이성.실험결과표명,p293가응용우HEV숙주흡부화병독장배연구,위HEV적예방여진단연구전정료기출.