中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2012年
6期
823-828
,共6页
任志广%赵青%魏寅祥%贾砚寒%李新颖%黎燕%彭晖%马远方
任誌廣%趙青%魏寅祥%賈硯寒%李新穎%黎燕%彭暉%馬遠方
임지엄%조청%위인상%가연한%리신영%려연%팽휘%마원방
艾洛替尼%肝癌%细胞系%耐药
艾洛替尼%肝癌%細胞繫%耐藥
애락체니%간암%세포계%내약
目的 体外建立艾洛替尼(erlotinib)耐药的人肝癌细胞系HepG2/erlotinib,鉴定其生物学特性,并对其耐药机制进行初步探讨.方法 逐步递增艾洛替尼并最终给予艾洛替尼50μmol·L-1连续冲击HepG2细胞12个月,建立HepG2/erlotinib.磺酰罗丹明B法检测HepG2/erlotinib耐药倍数和耐药谱;测定细胞生长曲线并计算细胞增殖时间;流式细胞术检测细胞周期;RT-PCR和Western印迹法检测HepG2/erlotinib细胞乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因和蛋白的表达;流式细胞术检测细胞表面BCRP蛋白表达.结果 经过12个月艾洛替尼诱导的HepG2耐药细胞,艾洛替尼的IC50值为(72.3±6.1) μmol·L-1,艾洛替尼对正常HepG2细胞的IC50值为(10.6±0.3) μmol·L-1,耐药倍数为6.8±0.7,表明HepG2/erlotinib为艾洛替尼耐药细胞系.HepG2/erlotinib对顺铂、多柔比星、米托蒽醌和拓扑替康的IC50均大于正常HepG2细胞的IC50,表明产生交叉耐药性.HepG2细胞和HepG2/erlotinib细胞的群体倍增时间分别为(20.7±3.3)h和(26.7±1.2)h,耐药细胞倍增时间延长.与HepG2细胞相比,HepG2/erlotinib的S期细胞比例明显增高(P＜0.05),G0/G1期细胞比例明显降低(P＜0.01);HepG2/erlotinib细胞中BCRP基因和BCRP蛋白表达显著升高(P＜0.05).结论 建立的HepG2/erlotinib具有耐药细胞的特征和生物学特性,其耐药机制与BCRP蛋白表达增加有关.
目的 體外建立艾洛替尼(erlotinib)耐藥的人肝癌細胞繫HepG2/erlotinib,鑒定其生物學特性,併對其耐藥機製進行初步探討.方法 逐步遞增艾洛替尼併最終給予艾洛替尼50μmol·L-1連續遲擊HepG2細胞12箇月,建立HepG2/erlotinib.磺酰囉丹明B法檢測HepG2/erlotinib耐藥倍數和耐藥譜;測定細胞生長麯線併計算細胞增殖時間;流式細胞術檢測細胞週期;RT-PCR和Western印跡法檢測HepG2/erlotinib細胞乳腺癌耐藥蛋白(BCRP)基因和蛋白的錶達;流式細胞術檢測細胞錶麵BCRP蛋白錶達.結果 經過12箇月艾洛替尼誘導的HepG2耐藥細胞,艾洛替尼的IC50值為(72.3±6.1) μmol·L-1,艾洛替尼對正常HepG2細胞的IC50值為(10.6±0.3) μmol·L-1,耐藥倍數為6.8±0.7,錶明HepG2/erlotinib為艾洛替尼耐藥細胞繫.HepG2/erlotinib對順鉑、多柔比星、米託蒽醌和拓撲替康的IC50均大于正常HepG2細胞的IC50,錶明產生交扠耐藥性.HepG2細胞和HepG2/erlotinib細胞的群體倍增時間分彆為(20.7±3.3)h和(26.7±1.2)h,耐藥細胞倍增時間延長.與HepG2細胞相比,HepG2/erlotinib的S期細胞比例明顯增高(P＜0.05),G0/G1期細胞比例明顯降低(P＜0.01);HepG2/erlotinib細胞中BCRP基因和BCRP蛋白錶達顯著升高(P＜0.05).結論 建立的HepG2/erlotinib具有耐藥細胞的特徵和生物學特性,其耐藥機製與BCRP蛋白錶達增加有關.
목적 체외건립애락체니(erlotinib)내약적인간암세포계HepG2/erlotinib,감정기생물학특성,병대기내약궤제진행초보탐토.방법 축보체증애락체니병최종급여애락체니50μmol·L-1련속충격HepG2세포12개월,건립HepG2/erlotinib.광선라단명B법검측HepG2/erlotinib내약배수화내약보;측정세포생장곡선병계산세포증식시간;류식세포술검측세포주기;RT-PCR화Western인적법검측HepG2/erlotinib세포유선암내약단백(BCRP)기인화단백적표체;류식세포술검측세포표면BCRP단백표체.결과 경과12개월애락체니유도적HepG2내약세포,애락체니적IC50치위(72.3±6.1) μmol·L-1,애락체니대정상HepG2세포적IC50치위(10.6±0.3) μmol·L-1,내약배수위6.8±0.7,표명HepG2/erlotinib위애락체니내약세포계.HepG2/erlotinib대순박、다유비성、미탁은곤화탁복체강적IC50균대우정상HepG2세포적IC50,표명산생교차내약성.HepG2세포화HepG2/erlotinib세포적군체배증시간분별위(20.7±3.3)h화(26.7±1.2)h,내약세포배증시간연장.여HepG2세포상비,HepG2/erlotinib적S기세포비례명현증고(P＜0.05),G0/G1기세포비례명현강저(P＜0.01);HepG2/erlotinib세포중BCRP기인화BCRP단백표체현저승고(P＜0.05).결론 건립적HepG2/erlotinib구유내약세포적특정화생물학특성,기내약궤제여BCRP단백표체증가유관.
