厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2012年
6期
1074-1078
,共5页
蒙翠凤%饶晓璐%郑成已%王世媛%陈清西
矇翠鳳%饒曉璐%鄭成已%王世媛%陳清西
몽취봉%요효로%정성이%왕세원%진청서
IFN-ω%表达%纯化%N端测序%活性测定
IFN-ω%錶達%純化%N耑測序%活性測定
IFN-ω%표체%순화%N단측서%활성측정
ω干扰素(IFN-ω)是同IFN-α功能相近但抗原性不同的一类干扰素分子,它具有同IFN-α、IFN-γ以及肿瘤坏死因子α相似的抑制病毒复制的作用.采用5L发酵罐发酵表达IFN-ω,发酵培养液经超滤膜浓缩、SP层析柱梯度分离,得到糖基化的IFN-ω,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI TOF-TOF MS)和N端蛋白序列分析仪分析其分子质量和N端序列,用细胞病变抑制法测定活性.结果表明,诱导约48 h时,目的蛋白表达量最高,通过SP梯度洗脱,可将糖基化和非糖基化的IFN-ω分离,质谱分析糖基化蛋白样品,质谱峰为糖基化蛋白特有的峰.纯化后糖基化的IFN-ω抗病毒活性为1.46× 108 U/mL.
ω榦擾素(IFN-ω)是同IFN-α功能相近但抗原性不同的一類榦擾素分子,它具有同IFN-α、IFN-γ以及腫瘤壞死因子α相似的抑製病毒複製的作用.採用5L髮酵罐髮酵錶達IFN-ω,髮酵培養液經超濾膜濃縮、SP層析柱梯度分離,得到糖基化的IFN-ω,用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI TOF-TOF MS)和N耑蛋白序列分析儀分析其分子質量和N耑序列,用細胞病變抑製法測定活性.結果錶明,誘導約48 h時,目的蛋白錶達量最高,通過SP梯度洗脫,可將糖基化和非糖基化的IFN-ω分離,質譜分析糖基化蛋白樣品,質譜峰為糖基化蛋白特有的峰.純化後糖基化的IFN-ω抗病毒活性為1.46× 108 U/mL.
ω간우소(IFN-ω)시동IFN-α공능상근단항원성불동적일류간우소분자,타구유동IFN-α、IFN-γ이급종류배사인자α상사적억제병독복제적작용.채용5L발효관발효표체IFN-ω,발효배양액경초려막농축、SP층석주제도분리,득도당기화적IFN-ω,용기질보조격광해석전리비행시간질보(MALDI TOF-TOF MS)화N단단백서렬분석의분석기분자질량화N단서렬,용세포병변억제법측정활성.결과표명,유도약48 h시,목적단백표체량최고,통과SP제도세탈,가장당기화화비당기화적IFN-ω분리,질보분석당기화단백양품,질보봉위당기화단백특유적봉.순화후당기화적IFN-ω항병독활성위1.46× 108 U/mL.
