中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2012年
6期
107-111
,共5页
林剑青%王成成%肖春华%陈国华%贺竹梅
林劍青%王成成%肖春華%陳國華%賀竹梅
림검청%왕성성%초춘화%진국화%하죽매
黄曲霉%RNA提取%TES热酚法%RT-PCR%转录组测序
黃麯黴%RNA提取%TES熱酚法%RT-PCR%轉錄組測序
황곡매%RNA제취%TES열분법%RT-PCR%전록조측서
不断发展的研究技术对黄曲霉RNA的提取质量提出更高的要求,而真菌的细胞壁结构及其内源性RNase活性常是达到这一目标的主要障碍.以黄曲霉菌丝为材料,探讨了采用TES热酚法获得高质量总RNA的方法,并通过RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)和RNA-Sequencing(转录组测序)对获得的RNA进行了质量验证.结果显示,TES热酚法不但所用试剂价格低廉,该法所提取的RNA质量较高,其浓度、纯度和完整性均可满足RT-PCR、转录组测序的文库构建和高通量测序等对RNA要求较高的分子生物学实验.
不斷髮展的研究技術對黃麯黴RNA的提取質量提齣更高的要求,而真菌的細胞壁結構及其內源性RNase活性常是達到這一目標的主要障礙.以黃麯黴菌絲為材料,探討瞭採用TES熱酚法穫得高質量總RNA的方法,併通過RT-PCR(反轉錄聚閤酶鏈式反應)和RNA-Sequencing(轉錄組測序)對穫得的RNA進行瞭質量驗證.結果顯示,TES熱酚法不但所用試劑價格低廉,該法所提取的RNA質量較高,其濃度、純度和完整性均可滿足RT-PCR、轉錄組測序的文庫構建和高通量測序等對RNA要求較高的分子生物學實驗.
불단발전적연구기술대황곡매RNA적제취질량제출경고적요구,이진균적세포벽결구급기내원성RNase활성상시체도저일목표적주요장애.이황곡매균사위재료,탐토료채용TES열분법획득고질량총RNA적방법,병통과RT-PCR(반전록취합매련식반응)화RNA-Sequencing(전록조측서)대획득적RNA진행료질량험증.결과현시,TES열분법불단소용시제개격저렴,해법소제취적RNA질량교고,기농도、순도화완정성균가만족RT-PCR、전록조측서적문고구건화고통량측서등대RNA요구교고적분자생물학실험.
