中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2012年
6期
716-722
,共7页
方仕%罗小琴%吴晓滨%麦海妍%彭俊生%卢味%卓淑雨%叶艳彬
方仕%囉小琴%吳曉濱%麥海妍%彭俊生%盧味%卓淑雨%葉豔彬
방사%라소금%오효빈%맥해연%팽준생%로미%탁숙우%협염빈
矢车菊素-3-葡萄糖苷%信号转导与转录激活因子3%活性氧%血管平滑肌细胞%NADPH氧化酶活化蛋白1
矢車菊素-3-葡萄糖苷%信號轉導與轉錄激活因子3%活性氧%血管平滑肌細胞%NADPH氧化酶活化蛋白1
시차국소-3-포도당감%신호전도여전록격활인자3%활성양%혈관평활기세포%NADPH양화매활화단백1
[目的]探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)对TNF-α诱导的血管平滑肌增殖的影响及可能的机制.[方法]C57BL/6J小鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)购于ATCC,体外培养后以C3G对细胞进行预处理后观察TNF-α的促细胞增殖作用;Dihydroethidium (DHE)荧光染色检测VSMC在TNF-α作用下的活性氧(ROS)生成情况;实时定量PCR检测细胞内NADPH氧化酶活化蛋白1(NoxA1)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测细胞内NoxA1、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3及β-actin的表达水平.统计学方法采用单因素方差分析.[结果]C3G预处理能够抑制TNF-α诱导的VSMC增殖,该作用呈现剂量、时间依赖性.联合应用50 μmol/L C3G及100μmol/L apocynin显著减少TNF-α诱导ROS的生成.C3G联合apocynin较C3G或apocynin单独孵育更能显著抑制TNF-α处理下VSMC内NoxA1基因的表达及STAT3蛋白的磷酸化.应用ROS清除剂触媒(catalase 2 000 U/mL)能显著抑制TNF-α诱导的VSMC增殖及STAT3蛋白活化.[结论]C3G对抗TNF-α诱导VSMC增殖的机制很可能是通过削弱NoxA1导致的ROS生成,从而抑制STAT3蛋白的激活.
[目的]探討矢車菊素-3-葡萄糖苷(C3G)對TNF-α誘導的血管平滑肌增殖的影響及可能的機製.[方法]C57BL/6J小鼠主動脈平滑肌細胞(VSMC)購于ATCC,體外培養後以C3G對細胞進行預處理後觀察TNF-α的促細胞增殖作用;Dihydroethidium (DHE)熒光染色檢測VSMC在TNF-α作用下的活性氧(ROS)生成情況;實時定量PCR檢測細胞內NADPH氧化酶活化蛋白1(NoxA1)的mRNA水平;蛋白質印跡法檢測細胞內NoxA1、信號轉導與轉錄激活因子3(STAT3)、燐痠化STAT3及β-actin的錶達水平.統計學方法採用單因素方差分析.[結果]C3G預處理能夠抑製TNF-α誘導的VSMC增殖,該作用呈現劑量、時間依賴性.聯閤應用50 μmol/L C3G及100μmol/L apocynin顯著減少TNF-α誘導ROS的生成.C3G聯閤apocynin較C3G或apocynin單獨孵育更能顯著抑製TNF-α處理下VSMC內NoxA1基因的錶達及STAT3蛋白的燐痠化.應用ROS清除劑觸媒(catalase 2 000 U/mL)能顯著抑製TNF-α誘導的VSMC增殖及STAT3蛋白活化.[結論]C3G對抗TNF-α誘導VSMC增殖的機製很可能是通過削弱NoxA1導緻的ROS生成,從而抑製STAT3蛋白的激活.
[목적]탐토시차국소-3-포도당감(C3G)대TNF-α유도적혈관평활기증식적영향급가능적궤제.[방법]C57BL/6J소서주동맥평활기세포(VSMC)구우ATCC,체외배양후이C3G대세포진행예처리후관찰TNF-α적촉세포증식작용;Dihydroethidium (DHE)형광염색검측VSMC재TNF-α작용하적활성양(ROS)생성정황;실시정량PCR검측세포내NADPH양화매활화단백1(NoxA1)적mRNA수평;단백질인적법검측세포내NoxA1、신호전도여전록격활인자3(STAT3)、린산화STAT3급β-actin적표체수평.통계학방법채용단인소방차분석.[결과]C3G예처리능구억제TNF-α유도적VSMC증식,해작용정현제량、시간의뢰성.연합응용50 μmol/L C3G급100μmol/L apocynin현저감소TNF-α유도ROS적생성.C3G연합apocynin교C3G혹apocynin단독부육경능현저억제TNF-α처리하VSMC내NoxA1기인적표체급STAT3단백적린산화.응용ROS청제제촉매(catalase 2 000 U/mL)능현저억제TNF-α유도적VSMC증식급STAT3단백활화.[결론]C3G대항TNF-α유도VSMC증식적궤제흔가능시통과삭약NoxA1도치적ROS생성,종이억제STAT3단백적격활.
