实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2012年
6期
493-498
,共6页
夏敏杰%成倩倩%王玉柱%田芳%温成丽%王晓东%李卫华%丁训诚
夏敏傑%成倩倩%王玉柱%田芳%溫成麗%王曉東%李衛華%丁訓誠
하민걸%성천천%왕옥주%전방%온성려%왕효동%리위화%정훈성
uPA基因缺失小鼠%肝纤维化%a-SMA%MMP13
uPA基因缺失小鼠%肝纖維化%a-SMA%MMP13
uPA기인결실소서%간섬유화%a-SMA%MMP13
目的 采用uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠构建肝纤维化动物模型,经a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)与金属基质蛋白酶-13(MMP13)的表达分析,评价其可行性.方法 选取成年雄性BL/6J野生型和uPA-/-基因缺失型小鼠,分为4组:对照组(Con-WT,Con-uPA-/-)和模型组(Mod-WT,Mod-uPA-/-),每组20只.模型组小鼠腹腔注射10% CCl4,对照组小鼠腹腔注射橄榄油,每周2次,连续6周,诱导小鼠肝纤维化.用Real-time PCR方法检测小鼠肝脏组织中a-SMA和MMP13的mRNA表达,Western blot及免疫组化分析a-SMA和MMP13的蛋白表达.结果 Real-time PCR结果显示,uPA-/-小鼠的肝脏中a-SMA、MMP 13的mRNA表达量显著高于WT小鼠;Western blot结果显示,a-SMA蛋白和MMP13蛋白在对照组小鼠肝脏中几乎不表达,在Mod-WT中有少量表达,在Mod-uPA-/-中表达明显增多;免疫组化结果显示,Mod-uPA-/-的a-SMA和MMP13表达高于Mod-WT.结论 a-SMA的mRNA和蛋白表达在uPA-/-小鼠中均明显升高,uPA基因的缺失促进了肝星型细胞向肌成纤维细胞的转化,从而加速了细胞外基质蛋白在肝脏中的沉积;MMP13蛋白表达在肝纤维化模型小鼠中均有明显升高.uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠是建立肝纤维化模型的易感品系.
目的 採用uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠構建肝纖維化動物模型,經a-平滑肌肌動蛋白(a-SMA)與金屬基質蛋白酶-13(MMP13)的錶達分析,評價其可行性.方法 選取成年雄性BL/6J野生型和uPA-/-基因缺失型小鼠,分為4組:對照組(Con-WT,Con-uPA-/-)和模型組(Mod-WT,Mod-uPA-/-),每組20隻.模型組小鼠腹腔註射10% CCl4,對照組小鼠腹腔註射橄欖油,每週2次,連續6週,誘導小鼠肝纖維化.用Real-time PCR方法檢測小鼠肝髒組織中a-SMA和MMP13的mRNA錶達,Western blot及免疫組化分析a-SMA和MMP13的蛋白錶達.結果 Real-time PCR結果顯示,uPA-/-小鼠的肝髒中a-SMA、MMP 13的mRNA錶達量顯著高于WT小鼠;Western blot結果顯示,a-SMA蛋白和MMP13蛋白在對照組小鼠肝髒中幾乎不錶達,在Mod-WT中有少量錶達,在Mod-uPA-/-中錶達明顯增多;免疫組化結果顯示,Mod-uPA-/-的a-SMA和MMP13錶達高于Mod-WT.結論 a-SMA的mRNA和蛋白錶達在uPA-/-小鼠中均明顯升高,uPA基因的缺失促進瞭肝星型細胞嚮肌成纖維細胞的轉化,從而加速瞭細胞外基質蛋白在肝髒中的沉積;MMP13蛋白錶達在肝纖維化模型小鼠中均有明顯升高.uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠是建立肝纖維化模型的易感品繫.
목적 채용uPA기인결실(uPA-/-)소서구건간섬유화동물모형,경a-평활기기동단백(a-SMA)여금속기질단백매-13(MMP13)적표체분석,평개기가행성.방법 선취성년웅성BL/6J야생형화uPA-/-기인결실형소서,분위4조:대조조(Con-WT,Con-uPA-/-)화모형조(Mod-WT,Mod-uPA-/-),매조20지.모형조소서복강주사10% CCl4,대조조소서복강주사감람유,매주2차,련속6주,유도소서간섬유화.용Real-time PCR방법검측소서간장조직중a-SMA화MMP13적mRNA표체,Western blot급면역조화분석a-SMA화MMP13적단백표체.결과 Real-time PCR결과현시,uPA-/-소서적간장중a-SMA、MMP 13적mRNA표체량현저고우WT소서;Western blot결과현시,a-SMA단백화MMP13단백재대조조소서간장중궤호불표체,재Mod-WT중유소량표체,재Mod-uPA-/-중표체명현증다;면역조화결과현시,Mod-uPA-/-적a-SMA화MMP13표체고우Mod-WT.결론 a-SMA적mRNA화단백표체재uPA-/-소서중균명현승고,uPA기인적결실촉진료간성형세포향기성섬유세포적전화,종이가속료세포외기질단백재간장중적침적;MMP13단백표체재간섬유화모형소서중균유명현승고.uPA기인결실(uPA-/-)소서시건립간섬유화모형적역감품계.