CAJ | 학술논문

[目的]制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础.[方法]利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性.[结果]通过间接ELISA筛选及3次亚克隆后,共获得5株大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6D3、6B4、7D2、7D1和7D4.经鉴定,发现5株杂交瘤细胞染色体数为90～110条,均大于亲本细胞,其亚类鉴定分别属于IgG2b、IgM、IgM、IgGl和IgM,其轻链均为κ型；5株单克隆抗体(6D3、6B4、7D2、7D1、7D4)的上清效价分别为1∶400、1∶3200、1∶25600、1∶6400和1∶6400,腹水效价分别为1∶104、1∶104、1∶105、1∶107和1∶106;而表位测定结果表明,5株单克隆抗体中,6D3与7D1、7D2以及7D4与7D1、7D2作用于不同表位,6D3与6B4可能识别同一表位或重叠表位,或同一表位有空间位阻,7D4与6D3以及6B4与7D4、7D1、7D2可能具有空间位阻；5株单克隆抗体的相对亲和力为:6B4＞7D4＞7D1 ＞6D3＞7D2；5株杂交瘤细胞株均能稳定地分泌单克隆抗体.[结论]制备获得的分泌排泄抗原单克隆抗体可用于大片吸虫病的诊断和免疫机理等方面的进一步研究.
[목적]제비대편흡충분비배설항원단극륭항체,위대편흡충병적면역진단、방치등연구전정기출.[방법]이용잡교류기술,이대편흡충분비배설항원위면역원제비단극륭항체,병용ELISA、류청산염세탈법등방법감정기생물학특성.[결과]통과간접ELISA사선급3차아극륭후,공획득5주대편흡충분비배설항원단극륭항체잡교류세포주,분별명명위6D3、6B4、7D2、7D1화7D4.경감정,발현5주잡교류세포염색체수위90～110조,균대우친본세포,기아류감정분별속우IgG2b、IgM、IgM、IgGl화IgM,기경련균위κ형；5주단극륭항체(6D3、6B4、7D2、7D1、7D4)적상청효개분별위1∶400、1∶3200、1∶25600、1∶6400화1∶6400,복수효개분별위1∶104、1∶104、1∶105、1∶107화1∶106;이표위측정결과표명,5주단극륭항체중,6D3여7D1、7D2이급7D4여7D1、7D2작용우불동표위,6D3여6B4가능식별동일표위혹중첩표위,혹동일표위유공간위조,7D4여6D3이급6B4여7D4、7D1、7D2가능구유공간위조；5주단극륭항체적상대친화력위:6B4＞7D4＞7D1 ＞6D3＞7D2；5주잡교류세포주균능은정지분비단극륭항체.[결론]제비획득적분비배설항원단극륭항체가용우대편흡충병적진단화면역궤리등방면적진일보연구.