实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2012年
19期
3166-3169
,共4页
刘海平%赵学凌%吴雪梅%周如丹
劉海平%趙學凌%吳雪梅%週如丹
류해평%조학릉%오설매%주여단
白细胞介素1β%纤溶酶原激活物抑制剂-1%内皮细胞%核转录因子-κB
白細胞介素1β%纖溶酶原激活物抑製劑-1%內皮細胞%覈轉錄因子-κB
백세포개소1β%섬용매원격활물억제제-1%내피세포%핵전록인자-κB
探讨白介素-1β(IL-1β)在诱导人脐静脉内皮细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)中的作用及机制.方法:培养原代人脐静脉内皮细胞,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法监测不同浓度IL-1β刺激下的细胞活性;Real Time PCR及蛋白质印迹检测不同时间及不同浓度的IL-1β对PAI-1基因及蛋白表达的影响;进一步用核转录因子-KB(NF-κB)拮抗剂PDTC(5 mol/L)探讨信号传导机制,检测IL-1β对PAI-1的诱导情况.结果:MTT结果示IL-1β在0～10 ng/mL浓度下,细胞的活性不受影响(P＞0.05),20 ng/mL IL-1β刺激下细胞活性改变(P＜0.05),差异有统计学意义;不同浓度IL-1β刺激下人脐静脉内皮细胞内PAI-1基因及蛋白的表达成时间依赖性,6h后开始增高(P＜0.05),12h后达峰值(P＜0.01),24 h后开始下降(P＜0.05),差异有统计学意义;IL-1β对PAI-1的刺激作用亦呈剂量依赖性,随着浓度(0、0.1、1、10 ng/mL)的增加,PAI-1基因及蛋白的表达亦明显增加(P＜0.05),差异有统计学意义;进一步的信号通路研究实验结果显示NF-κB拮抗剂PDTC可抑制IL-1β的诱导作用(P＜0.05).结论:在人脐静脉内皮细胞中,IL-1β可通过NF-κB信号途径上调PAI-1的表达,PDTC可抑制其上调作用.
探討白介素-1β(IL-1β)在誘導人臍靜脈內皮細胞錶達纖溶酶原激活物抑製劑-1(PAI-1)中的作用及機製.方法:培養原代人臍靜脈內皮細胞,四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法鑑測不同濃度IL-1β刺激下的細胞活性;Real Time PCR及蛋白質印跡檢測不同時間及不同濃度的IL-1β對PAI-1基因及蛋白錶達的影響;進一步用覈轉錄因子-KB(NF-κB)拮抗劑PDTC(5 mol/L)探討信號傳導機製,檢測IL-1β對PAI-1的誘導情況.結果:MTT結果示IL-1β在0～10 ng/mL濃度下,細胞的活性不受影響(P＞0.05),20 ng/mL IL-1β刺激下細胞活性改變(P＜0.05),差異有統計學意義;不同濃度IL-1β刺激下人臍靜脈內皮細胞內PAI-1基因及蛋白的錶達成時間依賴性,6h後開始增高(P＜0.05),12h後達峰值(P＜0.01),24 h後開始下降(P＜0.05),差異有統計學意義;IL-1β對PAI-1的刺激作用亦呈劑量依賴性,隨著濃度(0、0.1、1、10 ng/mL)的增加,PAI-1基因及蛋白的錶達亦明顯增加(P＜0.05),差異有統計學意義;進一步的信號通路研究實驗結果顯示NF-κB拮抗劑PDTC可抑製IL-1β的誘導作用(P＜0.05).結論:在人臍靜脈內皮細胞中,IL-1β可通過NF-κB信號途徑上調PAI-1的錶達,PDTC可抑製其上調作用.
탐토백개소-1β(IL-1β)재유도인제정맥내피세포표체섬용매원격활물억제제-1(PAI-1)중적작용급궤제.방법:배양원대인제정맥내피세포,사갑기우담서염미량매반응비색법감측불동농도IL-1β자격하적세포활성;Real Time PCR급단백질인적검측불동시간급불동농도적IL-1β대PAI-1기인급단백표체적영향;진일보용핵전록인자-KB(NF-κB)길항제PDTC(5 mol/L)탐토신호전도궤제,검측IL-1β대PAI-1적유도정황.결과:MTT결과시IL-1β재0～10 ng/mL농도하,세포적활성불수영향(P＞0.05),20 ng/mL IL-1β자격하세포활성개변(P＜0.05),차이유통계학의의;불동농도IL-1β자격하인제정맥내피세포내PAI-1기인급단백적표체성시간의뢰성,6h후개시증고(P＜0.05),12h후체봉치(P＜0.01),24 h후개시하강(P＜0.05),차이유통계학의의;IL-1β대PAI-1적자격작용역정제량의뢰성,수착농도(0、0.1、1、10 ng/mL)적증가,PAI-1기인급단백적표체역명현증가(P＜0.05),차이유통계학의의;진일보적신호통로연구실험결과현시NF-κB길항제PDTC가억제IL-1β적유도작용(P＜0.05).결론:재인제정맥내피세포중,IL-1β가통과NF-κB신호도경상조PAI-1적표체,PDTC가억제기상조작용.
