南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
11期
1621-1625
,共5页
梁俊%张妍%陈忠良%莫璋红%范业赓%吴凯朝%李鸣%李杨瑞
樑俊%張妍%陳忠良%莫璋紅%範業賡%吳凱朝%李鳴%李楊瑞
량준%장연%진충량%막장홍%범업갱%오개조%리명%리양서
甘蔗%水稻%玉米%花生%大豆%DNA提取%SSR
甘蔗%水稻%玉米%花生%大豆%DNA提取%SSR
감자%수도%옥미%화생%대두%DNA제취%SSR
sugarcane%rice%maize%peanut%soybean%DNA extraction%SSR
[目的]建立一种新的、通用、快速的农作物基因组总DNA提取方法,为应用分子标记技术研究遗传多样性及变异提供方便.[方法]分别从甘蔗、水稻、玉米、花生和大豆5种作物中提取基因组DNA,用琼脂糖凝胶电泳对所提取的DNA质量进行检测,然后每种作物分别选取两对SSR引物进行PCR扩增,用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增结果.[结果]采用该提取方法,不同作物产生的纯DNA在100.0～160.0 g/g,提取DNA的A260/A280比率在1.80～1.95.此外,电泳凝胶未出现可见的RNA污染,每个作物基因组DNA单一条带非常清晰,DNA结构完整,质量较高,适用于分子标记的研究.应用SSR分子标记进行PCR扩增,重复性、稳定性好,经琼脂糖凝胶电泳检测,条带清晰且分辨率较高.[结论]建立的DNA提取方法为直接将叶片剪碎后装入EP管中,加入提取缓冲液进行DNA提取,省去了用液氮研磨的过程.与传统的DNA分离方法相比,新建立的DNA提取方法具有高通量、简单、快速、经济效益高等优点.
[目的]建立一種新的、通用、快速的農作物基因組總DNA提取方法,為應用分子標記技術研究遺傳多樣性及變異提供方便.[方法]分彆從甘蔗、水稻、玉米、花生和大豆5種作物中提取基因組DNA,用瓊脂糖凝膠電泳對所提取的DNA質量進行檢測,然後每種作物分彆選取兩對SSR引物進行PCR擴增,用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測擴增結果.[結果]採用該提取方法,不同作物產生的純DNA在100.0～160.0 g/g,提取DNA的A260/A280比率在1.80～1.95.此外,電泳凝膠未齣現可見的RNA汙染,每箇作物基因組DNA單一條帶非常清晰,DNA結構完整,質量較高,適用于分子標記的研究.應用SSR分子標記進行PCR擴增,重複性、穩定性好,經瓊脂糖凝膠電泳檢測,條帶清晰且分辨率較高.[結論]建立的DNA提取方法為直接將葉片剪碎後裝入EP管中,加入提取緩遲液進行DNA提取,省去瞭用液氮研磨的過程.與傳統的DNA分離方法相比,新建立的DNA提取方法具有高通量、簡單、快速、經濟效益高等優點.
[목적]건립일충신적、통용、쾌속적농작물기인조총DNA제취방법,위응용분자표기기술연구유전다양성급변이제공방편.[방법]분별종감자、수도、옥미、화생화대두5충작물중제취기인조DNA,용경지당응효전영대소제취적DNA질량진행검측,연후매충작물분별선취량대SSR인물진행PCR확증,용취병희선알응효전영검측확증결과.[결과]채용해제취방법,불동작물산생적순DNA재100.0～160.0 g/g,제취DNA적A260/A280비솔재1.80～1.95.차외,전영응효미출현가견적RNA오염,매개작물기인조DNA단일조대비상청석,DNA결구완정,질량교고,괄용우분자표기적연구.응용SSR분자표기진행PCR확증,중복성、은정성호,경경지당응효전영검측,조대청석차분변솔교고.[결론]건립적DNA제취방법위직접장협편전쇄후장입EP관중,가입제취완충액진행DNA제취,성거료용액담연마적과정.여전통적DNA분리방법상비,신건립적DNA제취방법구유고통량、간단、쾌속、경제효익고등우점.
