中华移植杂志（电子版）
中華移植雜誌（電子版）
중화이식잡지（전자판）
Chinese Journal of Transplantation(Electronic Version)
2012年
2期
118-124
,共7页
王晓明%许林海%聂良明%孟群
王曉明%許林海%聶良明%孟群
왕효명%허림해%섭량명%맹군
心包%干细胞%WT1%心肌细胞%细胞分化%视频
心包%榦細胞%WT1%心肌細胞%細胞分化%視頻
심포%간세포%WT1%심기세포%세포분화%시빈
目的 了解大鼠心包膜组织中分离和培养干细胞的可行性、细胞特性和分化成心肌细胞的能力,为心包膜组织干细胞用于心脏疾病细胞治疗提供理论依据.方法 取Wistar大鼠制备心肌梗死模型后取心包组织,胶原酶消化法分离心包膜组织干细胞,并进一步梯度离心纯化,培养并适时传代,测定其生长曲线;分别用流式细胞仪和免疫组织化学法检测分离细胞的免疫表型.用5-氮杂胞苷诱导心包膜组织干细胞向心肌细胞分化,分化后的细胞表型分别用免疫组织化学法和反转录PCR分析检测.结果 分离细胞成梭状,体外培养呈良好增长,组织形态与心脏干细胞相似.免疫表型呈CD29、CD44、CD90阳性,部分呈CD106阳性,而CD34和CD45阴性;95%为WT1阳性细胞,并有少量的c-kit、心脏肌钙蛋白T、GATA-4、KDR阳性细胞.在药物诱导7 d后,部分细胞聚集成细胞团,可见单个细胞开始自发性博动,可以观测到明显的肌小节结构,并同时有心源性转录因子和结构蛋白在转录水平表达.结论 心包膜组织干细胞具有间充质干细胞的基本特征,并具有多样免疫表型,其中以WT1阳性细胞为主;纯化的WT1阳性细胞具有定向分化心肌细胞的潜能,提示心包膜组织可以作为心脏疾病细胞治疗的供体来源之一.
目的 瞭解大鼠心包膜組織中分離和培養榦細胞的可行性、細胞特性和分化成心肌細胞的能力,為心包膜組織榦細胞用于心髒疾病細胞治療提供理論依據.方法 取Wistar大鼠製備心肌梗死模型後取心包組織,膠原酶消化法分離心包膜組織榦細胞,併進一步梯度離心純化,培養併適時傳代,測定其生長麯線;分彆用流式細胞儀和免疫組織化學法檢測分離細胞的免疫錶型.用5-氮雜胞苷誘導心包膜組織榦細胞嚮心肌細胞分化,分化後的細胞錶型分彆用免疫組織化學法和反轉錄PCR分析檢測.結果 分離細胞成梭狀,體外培養呈良好增長,組織形態與心髒榦細胞相似.免疫錶型呈CD29、CD44、CD90暘性,部分呈CD106暘性,而CD34和CD45陰性;95%為WT1暘性細胞,併有少量的c-kit、心髒肌鈣蛋白T、GATA-4、KDR暘性細胞.在藥物誘導7 d後,部分細胞聚集成細胞糰,可見單箇細胞開始自髮性博動,可以觀測到明顯的肌小節結構,併同時有心源性轉錄因子和結構蛋白在轉錄水平錶達.結論 心包膜組織榦細胞具有間充質榦細胞的基本特徵,併具有多樣免疫錶型,其中以WT1暘性細胞為主;純化的WT1暘性細胞具有定嚮分化心肌細胞的潛能,提示心包膜組織可以作為心髒疾病細胞治療的供體來源之一.
목적 료해대서심포막조직중분리화배양간세포적가행성、세포특성화분화성심기세포적능력,위심포막조직간세포용우심장질병세포치료제공이론의거.방법 취Wistar대서제비심기경사모형후취심포조직,효원매소화법분리심포막조직간세포,병진일보제도리심순화,배양병괄시전대,측정기생장곡선;분별용류식세포의화면역조직화학법검측분리세포적면역표형.용5-담잡포감유도심포막조직간세포향심기세포분화,분화후적세포표형분별용면역조직화학법화반전록PCR분석검측.결과 분리세포성사상,체외배양정량호증장,조직형태여심장간세포상사.면역표형정CD29、CD44、CD90양성,부분정CD106양성,이CD34화CD45음성;95%위WT1양성세포,병유소량적c-kit、심장기개단백T、GATA-4、KDR양성세포.재약물유도7 d후,부분세포취집성세포단,가견단개세포개시자발성박동,가이관측도명현적기소절결구,병동시유심원성전록인자화결구단백재전록수평표체.결론 심포막조직간세포구유간충질간세포적기본특정,병구유다양면역표형,기중이WT1양성세포위주;순화적WT1양성세포구유정향분화심기세포적잠능,제시심포막조직가이작위심장질병세포치료적공체래원지일.
