中国中西医结合肾病杂志
中國中西醫結閤腎病雜誌
중국중서의결합신병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN NEPHROLOGY
2012年
12期
1058-1061,后插1,后插2
,共6页
田寿福%郭烨%牛鑫%袁霆%胡斌%郭尚春%汪年松%汪泱
田壽福%郭燁%牛鑫%袁霆%鬍斌%郭尚春%汪年鬆%汪泱
전수복%곽엽%우흠%원정%호빈%곽상춘%왕년송%왕앙
生长因子%诱导%胚胎干细胞%肾脏前体细胞
生長因子%誘導%胚胎榦細胞%腎髒前體細胞
생장인자%유도%배태간세포%신장전체세포
目的:探讨细胞生长因子联合诱导胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)向肾脏前体细胞定向分化的实验技术,为应用胚胎干细胞进行肾脏再生提供实验基础.方法:小鼠ES细胞悬浮培养2 d制备成拟胚体,RA、activin-A、Bmp7三种生长因子诱导培养5 d设为A组,不加生长因子培养设为对照(B组),生长因子培养5天后继续以肾脏上皮细胞生长培养液培养7 d设为C组,免疫荧光检测Pax2、Bry、WT1蛋白表达情况,流式细胞技术检测Pax2、Bry、CD24阳性细胞比例,realtime PCR检测Pax2、Bry、Osr1、Lim1、WT1、Six2、Sall1、AQP1、CD24、PDGFR基因表达情况.结果:免疫荧光染色结果显示A组细胞Pax2、Bry、WT1的表达明显高于B组;流式细胞技术检测显示A组Pax2、Bry、CD24阳性细胞比例较B组增加,C组表达Pax2、Bry的阳性细胞比例较A组明显升高;realtime PCR检测显示A组Pax2、Bry、Osr1、Lim1、WT1表达较B组明显增加(P<0.05或P<0.01),C组表达CD24基因较A组明显升高(P<0.05).结论:胚胎干细胞在体外生长因子联合诱导条件下能够分化为早期肾脏前体细胞,并表达部分成熟肾脏细胞的标记物.
目的:探討細胞生長因子聯閤誘導胚胎榦細胞(embryonic stem cell,ES細胞)嚮腎髒前體細胞定嚮分化的實驗技術,為應用胚胎榦細胞進行腎髒再生提供實驗基礎.方法:小鼠ES細胞懸浮培養2 d製備成擬胚體,RA、activin-A、Bmp7三種生長因子誘導培養5 d設為A組,不加生長因子培養設為對照(B組),生長因子培養5天後繼續以腎髒上皮細胞生長培養液培養7 d設為C組,免疫熒光檢測Pax2、Bry、WT1蛋白錶達情況,流式細胞技術檢測Pax2、Bry、CD24暘性細胞比例,realtime PCR檢測Pax2、Bry、Osr1、Lim1、WT1、Six2、Sall1、AQP1、CD24、PDGFR基因錶達情況.結果:免疫熒光染色結果顯示A組細胞Pax2、Bry、WT1的錶達明顯高于B組;流式細胞技術檢測顯示A組Pax2、Bry、CD24暘性細胞比例較B組增加,C組錶達Pax2、Bry的暘性細胞比例較A組明顯升高;realtime PCR檢測顯示A組Pax2、Bry、Osr1、Lim1、WT1錶達較B組明顯增加(P<0.05或P<0.01),C組錶達CD24基因較A組明顯升高(P<0.05).結論:胚胎榦細胞在體外生長因子聯閤誘導條件下能夠分化為早期腎髒前體細胞,併錶達部分成熟腎髒細胞的標記物.
목적:탐토세포생장인자연합유도배태간세포(embryonic stem cell,ES세포)향신장전체세포정향분화적실험기술,위응용배태간세포진행신장재생제공실험기출.방법:소서ES세포현부배양2 d제비성의배체,RA、activin-A、Bmp7삼충생장인자유도배양5 d설위A조,불가생장인자배양설위대조(B조),생장인자배양5천후계속이신장상피세포생장배양액배양7 d설위C조,면역형광검측Pax2、Bry、WT1단백표체정황,류식세포기술검측Pax2、Bry、CD24양성세포비례,realtime PCR검측Pax2、Bry、Osr1、Lim1、WT1、Six2、Sall1、AQP1、CD24、PDGFR기인표체정황.결과:면역형광염색결과현시A조세포Pax2、Bry、WT1적표체명현고우B조;류식세포기술검측현시A조Pax2、Bry、CD24양성세포비례교B조증가,C조표체Pax2、Bry적양성세포비례교A조명현승고;realtime PCR검측현시A조Pax2、Bry、Osr1、Lim1、WT1표체교B조명현증가(P<0.05혹P<0.01),C조표체CD24기인교A조명현승고(P<0.05).결론:배태간세포재체외생장인자연합유도조건하능구분화위조기신장전체세포,병표체부분성숙신장세포적표기물.
