CAJ | 학술논문

目的:研究足细胞裂孔膜分子nephrin调节血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的足细胞骨架分布改变的分子机制.方法:用AngⅡ及AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦或Akt抑制剂LY294002刺激足细胞,FITC-phalloidin染色标记F-actin,分析足细胞骨架运动.Real-time RT-PCR、RT-PCR和Western blotting检测nephrin mRNA和蛋白表达.转染nephrin全长表达质粒(pcDNA3.1-mNPHS1),建立稳定转染足细胞系,Western blotting检测转染细胞的Akt磷酸化水平,FITC-phalloidin染色分析高表达nephrin对F-actin分布影响.结果:AngⅡ和LY294002刺激后,足细胞的F-actin重组,应力纤维减少,形成F-actin外周环.氯沙坦显著抑制F-actin重排.AngⅡ刺激后nephrin mRNA和蛋白表达显著降低,Akt磷酸化水平降低.pcDNA3.1-mNPHS1转染显著上调足细胞Akt磷酸化水平,促进足细胞短线状足突形成,部分抑制AngⅡ诱导的骨架重排.结论:PI3K/Akt是nephrin和AngⅡ的共同下游通路.Nephrin能通过PI3K/Akt途径部分稳定AngⅡ诱导的足细胞细胞骨架改变.
목적:연구족세포렬공막분자nephrin조절혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)유도적족세포골가분포개변적분자궤제.방법:용AngⅡ급AngⅡ수체길항제록사탄혹Akt억제제LY294002자격족세포,FITC-phalloidin염색표기F-actin,분석족세포골가운동.Real-time RT-PCR、RT-PCR화Western blotting검측nephrin mRNA화단백표체.전염nephrin전장표체질립(pcDNA3.1-mNPHS1),건립은정전염족세포계,Western blotting검측전염세포적Akt린산화수평,FITC-phalloidin염색분석고표체nephrin대F-actin분포영향.결과:AngⅡ화LY294002자격후,족세포적F-actin중조,응력섬유감소,형성F-actin외주배.록사탄현저억제F-actin중배.AngⅡ자격후nephrin mRNA화단백표체현저강저,Akt린산화수평강저.pcDNA3.1-mNPHS1전염현저상조족세포Akt린산화수평,촉진족세포단선상족돌형성,부분억제AngⅡ유도적골가중배.결론:PI3K/Akt시nephrin화AngⅡ적공동하유통로.Nephrin능통과PI3K/Akt도경부분은정AngⅡ유도적족세포세포골가개변.