江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
9期
36-39
,共4页
四倍体%菘蓝%遗传差异性%ISSR-PCR%退火温度
四倍體%菘藍%遺傳差異性%ISSR-PCR%退火溫度
사배체%숭람%유전차이성%ISSR-PCR%퇴화온도
采用单因子试验,研究引物、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶及退火温度对PCR扩增的影响,用其建立优化四倍体菘蓝的ISSR-PCR反应体系,分析不同四倍体菘蓝株系的遗传差异性.结果发现ISSR-PCR最佳反应体系为:在25 μL的反应体系中,引物浓度为0.76 μmol/L,dNTPs浓度为190 μmol/L,MgCl2浓度为200 μmol/L,Taq DNA 聚合酶用量为1.5U,模板DNA浓度为20 ng/μL;确定了不同引物最佳退火温度；菘蓝株系间具有中等偏高的遗传差异性,多态性条带达58.22％.表明采用单因子试验可以快速建立ISSR-PCR反应体系,可用于菘蓝遗传差异性分析.
採用單因子試驗,研究引物、dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚閤酶及退火溫度對PCR擴增的影響,用其建立優化四倍體菘藍的ISSR-PCR反應體繫,分析不同四倍體菘藍株繫的遺傳差異性.結果髮現ISSR-PCR最佳反應體繫為:在25 μL的反應體繫中,引物濃度為0.76 μmol/L,dNTPs濃度為190 μmol/L,MgCl2濃度為200 μmol/L,Taq DNA 聚閤酶用量為1.5U,模闆DNA濃度為20 ng/μL;確定瞭不同引物最佳退火溫度；菘藍株繫間具有中等偏高的遺傳差異性,多態性條帶達58.22％.錶明採用單因子試驗可以快速建立ISSR-PCR反應體繫,可用于菘藍遺傳差異性分析.
채용단인자시험,연구인물、dNTPs、Mg2+、Taq DNA취합매급퇴화온도대PCR확증적영향,용기건립우화사배체숭람적ISSR-PCR반응체계,분석불동사배체숭람주계적유전차이성.결과발현ISSR-PCR최가반응체계위:재25 μL적반응체계중,인물농도위0.76 μmol/L,dNTPs농도위190 μmol/L,MgCl2농도위200 μmol/L,Taq DNA 취합매용량위1.5U,모판DNA농도위20 ng/μL;학정료불동인물최가퇴화온도；숭람주계간구유중등편고적유전차이성,다태성조대체58.22％.표명채용단인자시험가이쾌속건립ISSR-PCR반응체계,가용우숭람유전차이성분석.
