江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
9期
28-31
,共4页
刘航%田永强%张韵%李志勇%柳纪省
劉航%田永彊%張韻%李誌勇%柳紀省
류항%전영강%장운%리지용%류기성
A型口蹄疫病毒%基因工程疫苗%P1-2A3C基因%家蚕杆状病毒表达系统
A型口蹄疫病毒%基因工程疫苗%P1-2A3C基因%傢蠶桿狀病毒錶達繫統
A형구제역병독%기인공정역묘%P1-2A3C기인%가잠간상병독표체계통
口蹄疫是一种严重危害畜牧业生产的烈性传染病.为了促进A型口蹄疫病毒(FMDV)基因工程活载体疫苗的研制,选取A型FMDV编码序列中的衣壳蛋白前体PI-2A基因中的VP1和VP3以及亚洲Ⅰ型蛋白酶3C基因,插入家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组载体pVL-P1-2A3C,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒Bm-P1-2A3C.将重组病毒感染家蚕5龄幼虫,以双抗体夹心ELISA法检测血淋巴中的表达产物,结果显示目的蛋白在感染病毒后108 h的蚕血淋巴中表达量最高,A型抗原表达呈阳性的最大稀释倍数为1024,而亚洲Ⅰ型抗原表达呈阳性的最大稀释倍数为2048.结果表明A型和亚洲Ⅰ型FMDV的P1-2A3C基因已在家蚕体内获得表达.
口蹄疫是一種嚴重危害畜牧業生產的烈性傳染病.為瞭促進A型口蹄疫病毒(FMDV)基因工程活載體疫苗的研製,選取A型FMDV編碼序列中的衣殼蛋白前體PI-2A基因中的VP1和VP3以及亞洲Ⅰ型蛋白酶3C基因,插入傢蠶桿狀病毒轉移載體pVL1393中,構建重組載體pVL-P1-2A3C,併與線性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共轉染傢蠶BmN細胞,穫得重組病毒Bm-P1-2A3C.將重組病毒感染傢蠶5齡幼蟲,以雙抗體夾心ELISA法檢測血淋巴中的錶達產物,結果顯示目的蛋白在感染病毒後108 h的蠶血淋巴中錶達量最高,A型抗原錶達呈暘性的最大稀釋倍數為1024,而亞洲Ⅰ型抗原錶達呈暘性的最大稀釋倍數為2048.結果錶明A型和亞洲Ⅰ型FMDV的P1-2A3C基因已在傢蠶體內穫得錶達.
구제역시일충엄중위해축목업생산적렬성전염병.위료촉진A형구제역병독(FMDV)기인공정활재체역묘적연제,선취A형FMDV편마서렬중적의각단백전체PI-2A기인중적VP1화VP3이급아주Ⅰ형단백매3C기인,삽입가잠간상병독전이재체pVL1393중,구건중조재체pVL-P1-2A3C,병여선성화병독Bm-BacPAK6 DNA공전염가잠BmN세포,획득중조병독Bm-P1-2A3C.장중조병독감염가잠5령유충,이쌍항체협심ELISA법검측혈림파중적표체산물,결과현시목적단백재감염병독후108 h적잠혈림파중표체량최고,A형항원표체정양성적최대희석배수위1024,이아주Ⅰ형항원표체정양성적최대희석배수위2048.결과표명A형화아주Ⅰ형FMDV적P1-2A3C기인이재가잠체내획득표체.
