华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2012年
6期
675-679
,共5页
李军%王倩%林小星%李炳宗
李軍%王倩%林小星%李炳宗
리군%왕천%림소성%리병종
间充质干细胞%自噬%成骨%分化%雷帕霉素
間充質榦細胞%自噬%成骨%分化%雷帕黴素
간충질간세포%자서%성골%분화%뢰파매소
目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)自噬活性的改变对其向成骨细胞分化能力的影响,初步探讨自噬在骨髓MSCs成骨分化中的作用.方法 不同浓度的雷帕霉素处理骨髓MSCs 48 h后,向成骨细胞诱导分化2周.免疫荧光激光共聚焦法检测LC3表达;单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色检测自噬囊泡;Western blot检测LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达;实时定量PCR检测成骨相关基因ALP和Runx2表达;Von Kossa染色检测钙质沉积程度改变.结果 经雷帕霉素处理后,激光共聚焦和Western blot检测均可见骨髓MSCs中LC3的表达明显增加;自噬囊泡数量增加;成骨相关基因ALP和Runx2的mRNA表达量明显减少;Von kossa染色可见MSCs钙质沉积程度减弱.上述改变呈剂量依赖性.结论 骨髓MSCs的基础自噬活性较低,雷帕霉素能够增加骨髓MSCs的自噬活性,但同时减弱其向成骨细胞分化的潜能.自噬可能参与骨髓MSCs向成骨细胞分化的过程.
目的 觀察骨髓間充質榦細胞(MSCs)自噬活性的改變對其嚮成骨細胞分化能力的影響,初步探討自噬在骨髓MSCs成骨分化中的作用.方法 不同濃度的雷帕黴素處理骨髓MSCs 48 h後,嚮成骨細胞誘導分化2週.免疫熒光激光共聚焦法檢測LC3錶達;單丹磺酰戊二胺(MDC)熒光染色檢測自噬囊泡;Western blot檢測LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的錶達;實時定量PCR檢測成骨相關基因ALP和Runx2錶達;Von Kossa染色檢測鈣質沉積程度改變.結果 經雷帕黴素處理後,激光共聚焦和Western blot檢測均可見骨髓MSCs中LC3的錶達明顯增加;自噬囊泡數量增加;成骨相關基因ALP和Runx2的mRNA錶達量明顯減少;Von kossa染色可見MSCs鈣質沉積程度減弱.上述改變呈劑量依賴性.結論 骨髓MSCs的基礎自噬活性較低,雷帕黴素能夠增加骨髓MSCs的自噬活性,但同時減弱其嚮成骨細胞分化的潛能.自噬可能參與骨髓MSCs嚮成骨細胞分化的過程.
목적 관찰골수간충질간세포(MSCs)자서활성적개변대기향성골세포분화능력적영향,초보탐토자서재골수MSCs성골분화중적작용.방법 불동농도적뢰파매소처리골수MSCs 48 h후,향성골세포유도분화2주.면역형광격광공취초법검측LC3표체;단단광선무이알(MDC)형광염색검측자서낭포;Western blot검측LC3-Ⅰ화LC3-Ⅱ적표체;실시정량PCR검측성골상관기인ALP화Runx2표체;Von Kossa염색검측개질침적정도개변.결과 경뢰파매소처리후,격광공취초화Western blot검측균가견골수MSCs중LC3적표체명현증가;자서낭포수량증가;성골상관기인ALP화Runx2적mRNA표체량명현감소;Von kossa염색가견MSCs개질침적정도감약.상술개변정제량의뢰성.결론 골수MSCs적기출자서활성교저,뢰파매소능구증가골수MSCs적자서활성,단동시감약기향성골세포분화적잠능.자서가능삼여골수MSCs향성골세포분화적과정.
