CAJ | 학술논문

目的:探讨核因子κB(NF-κB)在抗β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用.方法:使用一定剂量的抗β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物处理THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA和总蛋白,实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞TF mRNA水平,TF活性试剂盒检测TF活性;Western blot检测细胞NF-κB p65、磷酸化-NF-κB p65及NF-κB抑制蛋白IκB-α的表达情况;进一步采用NF-κB抑制剂(PDTC)观察是否能干预抗β2GPⅠ/β2GPⅠ 复合物对细胞的刺激效应,并利用上游信号分子MAPKs的抑制剂观察抗β2GPⅠ/β2GPⅠ 复合物对NF-κB p65磷酸化的影响.结果:抗β2GPⅠ/β2GPⅠ 复合物(100 μg/ml)能够诱导THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);能够增强细胞内NF-κB p65磷酸化(P<0.05 vs media),降低IκB-α水平(P<0.05 vs media);NF-κB抑制剂PDTC(20 μmol/L)能够抑制抗β2GPⅠ/β2GPⅠ 复合物(100 μg/ml)诱导THP-1细胞表达TF及NF-κB磷酸化的效应;MAPKs抑制剂均能影响抗β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物(100 μg/ml)诱导THP-1细胞NF-κB p65磷酸化.结论:在抗β2GPⅠ/β2GPⅠ复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,NF-κB被激活并发挥重要作用,MAPKs为NF-κB的关键上游分子.
목적:탐토핵인자κB(NF-κB)재항β2GPⅠ/β2GPⅠ복합물유도단핵세포주THP-1표체조직인자(TF)중적작용.방법:사용일정제량적항β2GPⅠ/β2GPⅠ복합물처리THP-1세포일정시간,수집세포총RNA화총단백,실시정량PCR(RT-qPCR)검측세포TF mRNA수평,TF활성시제합검측TF활성;Western blot검측세포NF-κB p65、린산화-NF-κB p65급NF-κB억제단백IκB-α적표체정황;진일보채용NF-κB억제제(PDTC)관찰시부능간예항β2GPⅠ/β2GPⅠ 복합물대세포적자격효응,병이용상유신호분자MAPKs적억제제관찰항β2GPⅠ/β2GPⅠ 복합물대NF-κB p65린산화적영향.결과:항β2GPⅠ/β2GPⅠ 복합물(100 μg/ml)능구유도THP-1세포표체TF mRNA급활성,여대조상비차이현저(P<0.05);능구증강세포내NF-κB p65린산화(P<0.05 vs media),강저IκB-α수평(P<0.05 vs media);NF-κB억제제PDTC(20 μmol/L)능구억제항β2GPⅠ/β2GPⅠ 복합물(100 μg/ml)유도THP-1세포표체TF급NF-κB린산화적효응;MAPKs억제제균능영향항β2GPⅠ/β2GPⅠ복합물(100 μg/ml)유도THP-1세포NF-κB p65린산화.결론:재항β2GPⅠ/β2GPⅠ복합물유도THP-1세포표체TF과정중,NF-κB피격활병발휘중요작용,MAPKs위NF-κB적관건상유분자.