IFITM3基因的克隆及其在真核细胞中的表达与定位研究
IFITM3기인적극륭급기재진핵세포중적표체여정위연구
Cloning of IFITM3 gene and its expression, location in 293T eukaryotic cells
  • 万方数据
    中国免疫学杂志 중국면역학잡지
    CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
    2012年 11期 963-967 ,共5页

    朱娜%李昌%郭焱%李沂%孙丹丹%任静强%杜寿文%秦艳青%王茂鹏%田宇飞%金宁一

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    IFITM3%克隆%表达%定位 IFITM3%剋隆%錶達%定位
    IFITM3%극륭%표체%정위
    目的:干扰素rhIFN-α 2B体外诱导人胚胎肾细胞系293T细胞获得IFITM3基因,观察IFITM3基因在293T细胞中的表达与定位.方法:利用干扰素rhIFN-α 2B体外诱导293T细胞获得IFITM3基因,采用RT-PCR技术扩增获得干扰素诱导的跨膜蛋白IFITM3全长cDNA,扩增产物连接至pMD18-T载体上,测序正确后,将IFITM3基因亚克隆至真核表达载体pVAX1中获得重组质粒pV-IFITM3,通过转染293T细胞进行表达与定位研究.结果:RT-PCR和Western blot结果表明,获得的目的基因IFITM3能够表达,且具有良好抗原活性;激光共聚焦显微镜观察显示,IFITM3基因表达后主要分布于细胞膜上.结论:成功获得IFITM3基因,并验证了其表达.该研究为基于IFITM3的抗病毒药物以及探讨其抗病毒机制研究奠定了坚实基础.
    목적:간우소rhIFN-α 2B체외유도인배태신세포계293T세포획득IFITM3기인,관찰IFITM3기인재293T세포중적표체여정위.방법:이용간우소rhIFN-α 2B체외유도293T세포획득IFITM3기인,채용RT-PCR기술확증획득간우소유도적과막단백IFITM3전장cDNA,확증산물련접지pMD18-T재체상,측서정학후,장IFITM3기인아극륭지진핵표체재체pVAX1중획득중조질립pV-IFITM3,통과전염293T세포진행표체여정위연구.결과:RT-PCR화Western blot결과표명,획득적목적기인IFITM3능구표체,차구유량호항원활성;격광공취초현미경관찰현시,IFITM3기인표체후주요분포우세포막상.결론:성공획득IFITM3기인,병험증료기표체.해연구위기우IFITM3적항병독약물이급탐토기항병독궤제연구전정료견실기출.
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