实验与检验医学
實驗與檢驗醫學
실험여검험의학
EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
2012年
5期
433-436,425
,共5页
江梅%万腊根%简正伟%石淙%张长林
江梅%萬臘根%簡正偉%石淙%張長林
강매%만석근%간정위%석종%장장림
荧光定量PCR%PML/RARα%ABL%急性早幼粒细胞白血病
熒光定量PCR%PML/RARα%ABL%急性早幼粒細胞白血病
형광정량PCR%PML/RARα%ABL%급성조유립세포백혈병
目的 建立在一个反应体系中同时检测融合基因PML/RARα和内参基因ABL的双重荧光定量PCR方法.方法 从DNA聚合酶含量、Mg2+浓度和引物浓度等方面进行优化,建立检测PML/RARα和ABL基因双重荧光定量PCR体系,从分析灵敏度,批内、批间精密度以及检测临床样本阳性率等方面对双重荧光定量PCR反应体系进行性能评价,并同时和北京思尔成公司荧光定量PCR试剂盒进行比较,分析两者的一致性.结果 成功构建双重荧光定量PCR反应体系,检测质粒灵敏度为103copies/ml,检测NB4细胞的灵敏度为10-3,反应体系批内、批间精密度Ct值的变异系数CV都小于5％,检测20例确诊为APL病人,其检测阳性率,和北京思尔成公司的PCR反应试剂一致.结论 成功开发出稳定的双重荧光定量PCR试剂盒,其操作简单,成本低,误差小,能够有效地用于APL分子生物学分型诊断、用药指导、预后观察及MRD监测.
目的 建立在一箇反應體繫中同時檢測融閤基因PML/RARα和內參基因ABL的雙重熒光定量PCR方法.方法 從DNA聚閤酶含量、Mg2+濃度和引物濃度等方麵進行優化,建立檢測PML/RARα和ABL基因雙重熒光定量PCR體繫,從分析靈敏度,批內、批間精密度以及檢測臨床樣本暘性率等方麵對雙重熒光定量PCR反應體繫進行性能評價,併同時和北京思爾成公司熒光定量PCR試劑盒進行比較,分析兩者的一緻性.結果 成功構建雙重熒光定量PCR反應體繫,檢測質粒靈敏度為103copies/ml,檢測NB4細胞的靈敏度為10-3,反應體繫批內、批間精密度Ct值的變異繫數CV都小于5％,檢測20例確診為APL病人,其檢測暘性率,和北京思爾成公司的PCR反應試劑一緻.結論 成功開髮齣穩定的雙重熒光定量PCR試劑盒,其操作簡單,成本低,誤差小,能夠有效地用于APL分子生物學分型診斷、用藥指導、預後觀察及MRD鑑測.
목적 건립재일개반응체계중동시검측융합기인PML/RARα화내삼기인ABL적쌍중형광정량PCR방법.방법 종DNA취합매함량、Mg2+농도화인물농도등방면진행우화,건립검측PML/RARα화ABL기인쌍중형광정량PCR체계,종분석령민도,비내、비간정밀도이급검측림상양본양성솔등방면대쌍중형광정량PCR반응체계진행성능평개,병동시화북경사이성공사형광정량PCR시제합진행비교,분석량자적일치성.결과 성공구건쌍중형광정량PCR반응체계,검측질립령민도위103copies/ml,검측NB4세포적령민도위10-3,반응체계비내、비간정밀도Ct치적변이계수CV도소우5％,검측20례학진위APL병인,기검측양성솔,화북경사이성공사적PCR반응시제일치.결론 성공개발출은정적쌍중형광정량PCR시제합,기조작간단,성본저,오차소,능구유효지용우APL분자생물학분형진단、용약지도、예후관찰급MRD감측.
