复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2012年
6期
575-579
,共5页
唐海燕%杜鹏%李鑫%林豪杰%刘剑英%马昱%范薇%汪昕
唐海燕%杜鵬%李鑫%林豪傑%劉劍英%馬昱%範薇%汪昕
당해연%두붕%리흠%림호걸%류검영%마욱%범미%왕흔
过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(PGC-1α)%海马神经元%氧化应激%谷胱甘肽(GSH)%超氧化物歧化酶(SOD)%乳酸脱氢酶(LDH)%大鼠
過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子(PGC-1α)%海馬神經元%氧化應激%穀胱甘肽(GSH)%超氧化物歧化酶(SOD)%乳痠脫氫酶(LDH)%大鼠
과양화물매체증식물격활수체γ보격활자(PGC-1α)%해마신경원%양화응격%곡광감태(GSH)%초양화물기화매(SOD)%유산탈경매(LDH)%대서
目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator,PGC)-1α在海人酸(kainic acid,KA)诱导的培养大鼠海马神经元氧化应激及神经损伤中的作用.方法 离体培养大鼠海马神经元,采用电穿孔基因转染技术分别转染PGC-1α shRNA质粒和空载体质粒.培养7天后,用KA刺激上述海马神经元24 h,检测转染空载体质粒海马神经元(空白对照组,n=10)、KA刺激的转染PGC-1α shRNA质粒(实验组,n=11)和KA刺激的空载体质粒海马神经元(KA对照组,n=10)的谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性变化.FJB染色检测KA刺激24 h后实验组和KA对照组培养大鼠海马神经元神经损伤情况.结果 KA刺激24 h,培养的大鼠海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(5.74±0.54) μmol·L-1·μg-1 protein和(10.57±1.25) U/mg protein,较空白对照组显著降低[(9.38±0.72) μmol·L-1·μg-1 protein,P＜0.01；(23.12±3.23) U/mg protein,P＜0.01]；LDH活性为(2.21±0.18) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,较空白对照组海马神经元显著增高[(1.29±0.09) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,P＜0.01].转染PGC-1αshRNA质粒组,KA刺激24 h海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(3.37±0.42)μmol·L-1·μg-1 protein和(4.54±0.91) U/mg protein,较KA对照组海马神经元明显降低(P均＜0.05)；LDH活性为(2.74±0.19) mol/NADH+/min/mg protein,较KA对照组海马神经元显著增加(P＜0.01).FJB染色显示转染PGC-1α shRNA质粒组,KA刺激24h培养大鼠海马神经元损伤较KA对照组明显增加(P＜0.05).结论 PGC-1α基因下调加重KA刺激后培养大鼠海马神经元损伤,可能与其加重氧化应激损伤有关.
目的 探討過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子(peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator,PGC)-1α在海人痠(kainic acid,KA)誘導的培養大鼠海馬神經元氧化應激及神經損傷中的作用.方法 離體培養大鼠海馬神經元,採用電穿孔基因轉染技術分彆轉染PGC-1α shRNA質粒和空載體質粒.培養7天後,用KA刺激上述海馬神經元24 h,檢測轉染空載體質粒海馬神經元(空白對照組,n=10)、KA刺激的轉染PGC-1α shRNA質粒(實驗組,n=11)和KA刺激的空載體質粒海馬神經元(KA對照組,n=10)的穀胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)和乳痠脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性變化.FJB染色檢測KA刺激24 h後實驗組和KA對照組培養大鼠海馬神經元神經損傷情況.結果 KA刺激24 h,培養的大鼠海馬神經元GSH含量和SOD活性分彆為(5.74±0.54) μmol·L-1·μg-1 protein和(10.57±1.25) U/mg protein,較空白對照組顯著降低[(9.38±0.72) μmol·L-1·μg-1 protein,P＜0.01；(23.12±3.23) U/mg protein,P＜0.01]；LDH活性為(2.21±0.18) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,較空白對照組海馬神經元顯著增高[(1.29±0.09) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,P＜0.01].轉染PGC-1αshRNA質粒組,KA刺激24 h海馬神經元GSH含量和SOD活性分彆為(3.37±0.42)μmol·L-1·μg-1 protein和(4.54±0.91) U/mg protein,較KA對照組海馬神經元明顯降低(P均＜0.05)；LDH活性為(2.74±0.19) mol/NADH+/min/mg protein,較KA對照組海馬神經元顯著增加(P＜0.01).FJB染色顯示轉染PGC-1α shRNA質粒組,KA刺激24h培養大鼠海馬神經元損傷較KA對照組明顯增加(P＜0.05).結論 PGC-1α基因下調加重KA刺激後培養大鼠海馬神經元損傷,可能與其加重氧化應激損傷有關.
목적 탐토과양화물매체증식물격활수체γ보격활자(peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator,PGC)-1α재해인산(kainic acid,KA)유도적배양대서해마신경원양화응격급신경손상중적작용.방법 리체배양대서해마신경원,채용전천공기인전염기술분별전염PGC-1α shRNA질립화공재체질립.배양7천후,용KA자격상술해마신경원24 h,검측전염공재체질립해마신경원(공백대조조,n=10)、KA자격적전염PGC-1α shRNA질립(실험조,n=11)화KA자격적공재체질립해마신경원(KA대조조,n=10)적곡광감태(glutathione,GSH)함량、초양화물기화매(superoxidase dismutase,SOD)화유산탈경매(lactic dehydrogenase,LDH)활성변화.FJB염색검측KA자격24 h후실험조화KA대조조배양대서해마신경원신경손상정황.결과 KA자격24 h,배양적대서해마신경원GSH함량화SOD활성분별위(5.74±0.54) μmol·L-1·μg-1 protein화(10.57±1.25) U/mg protein,교공백대조조현저강저[(9.38±0.72) μmol·L-1·μg-1 protein,P＜0.01；(23.12±3.23) U/mg protein,P＜0.01]；LDH활성위(2.21±0.18) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,교공백대조조해마신경원현저증고[(1.29±0.09) mmol NADH,H+/min/100 mg protein,P＜0.01].전염PGC-1αshRNA질립조,KA자격24 h해마신경원GSH함량화SOD활성분별위(3.37±0.42)μmol·L-1·μg-1 protein화(4.54±0.91) U/mg protein,교KA대조조해마신경원명현강저(P균＜0.05)；LDH활성위(2.74±0.19) mol/NADH+/min/mg protein,교KA대조조해마신경원현저증가(P＜0.01).FJB염색현시전염PGC-1α shRNA질립조,KA자격24h배양대서해마신경원손상교KA대조조명현증가(P＜0.05).결론 PGC-1α기인하조가중KA자격후배양대서해마신경원손상,가능여기가중양화응격손상유관.
