南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
11期
1559-1563
,共5页
李晓青%陈鑫%黄珊%车少敏%张晓智
李曉青%陳鑫%黃珊%車少敏%張曉智
리효청%진흠%황산%차소민%장효지
食管癌%放射敏感性%miR-21%Wnt/β-catenin信号通路%p75NTR
食管癌%放射敏感性%miR-21%Wnt/β-catenin信號通路%p75NTR
식관암%방사민감성%miR-21%Wnt/β-catenin신호통로%p75NTR
目的 研究miR-21下调对食管癌TE-1细胞的放射敏感性的影响.方法 采用慢病毒介导的方法将含有反义miR21表达基因的载体转染至食管癌TE-1细胞系,嘌呤霉素筛选稳定下调miR21的食管癌细胞亚系,命名为TE-1-miR21-；荧光定量PCR检测TE-1-miR21-中miR21的相对表达量；细胞克隆形成实验测定TE-1和TE-1-miR21-细胞的放射敏感性；RT-PCR和Western-blot法测定TE-1和TE-1-miR21-细胞中β-catenin的变化；流式细胞术检测TE-1和TE-1-miR21-细胞中p75NTR+细胞的比例.结果 成功构建稳定下调miR21的食管癌细胞亚系TE-1-miR21-,荧光定量PCR结果显示miR21表达量明显下调；细胞克隆形成实验提示TE-1-miR21-细胞较TE-1细胞的放射敏感性明显增强；RT-PCR结果分析显示,TE-1-miR21-细胞与TE-1细胞的β-catenin mRNA的表达量无明显差异；Western blot的结果分析显示,TE-1-miR21-细胞在接受高剂量照射(8Gy,10 Gy)时,β-catenin蛋白量明显下降；流式细胞仪分析结果显示,TE-1-miR21-细胞中p75NTR+细胞的比例较TE-1细胞明显降低.结论 下调miR21可以增强食管癌TE-1细胞的放射敏感性；下调miR21增强放射敏感性的机制可能与wnt/β-catenin信号通路的活化程度降低以及食管癌TE-1细胞中p75NTR+细胞比例减少有关.
目的 研究miR-21下調對食管癌TE-1細胞的放射敏感性的影響.方法 採用慢病毒介導的方法將含有反義miR21錶達基因的載體轉染至食管癌TE-1細胞繫,嘌呤黴素篩選穩定下調miR21的食管癌細胞亞繫,命名為TE-1-miR21-；熒光定量PCR檢測TE-1-miR21-中miR21的相對錶達量；細胞剋隆形成實驗測定TE-1和TE-1-miR21-細胞的放射敏感性；RT-PCR和Western-blot法測定TE-1和TE-1-miR21-細胞中β-catenin的變化；流式細胞術檢測TE-1和TE-1-miR21-細胞中p75NTR+細胞的比例.結果 成功構建穩定下調miR21的食管癌細胞亞繫TE-1-miR21-,熒光定量PCR結果顯示miR21錶達量明顯下調；細胞剋隆形成實驗提示TE-1-miR21-細胞較TE-1細胞的放射敏感性明顯增彊；RT-PCR結果分析顯示,TE-1-miR21-細胞與TE-1細胞的β-catenin mRNA的錶達量無明顯差異；Western blot的結果分析顯示,TE-1-miR21-細胞在接受高劑量照射(8Gy,10 Gy)時,β-catenin蛋白量明顯下降；流式細胞儀分析結果顯示,TE-1-miR21-細胞中p75NTR+細胞的比例較TE-1細胞明顯降低.結論 下調miR21可以增彊食管癌TE-1細胞的放射敏感性；下調miR21增彊放射敏感性的機製可能與wnt/β-catenin信號通路的活化程度降低以及食管癌TE-1細胞中p75NTR+細胞比例減少有關.
목적 연구miR-21하조대식관암TE-1세포적방사민감성적영향.방법 채용만병독개도적방법장함유반의miR21표체기인적재체전염지식관암TE-1세포계,표령매소사선은정하조miR21적식관암세포아계,명명위TE-1-miR21-；형광정량PCR검측TE-1-miR21-중miR21적상대표체량；세포극륭형성실험측정TE-1화TE-1-miR21-세포적방사민감성；RT-PCR화Western-blot법측정TE-1화TE-1-miR21-세포중β-catenin적변화；류식세포술검측TE-1화TE-1-miR21-세포중p75NTR+세포적비례.결과 성공구건은정하조miR21적식관암세포아계TE-1-miR21-,형광정량PCR결과현시miR21표체량명현하조；세포극륭형성실험제시TE-1-miR21-세포교TE-1세포적방사민감성명현증강；RT-PCR결과분석현시,TE-1-miR21-세포여TE-1세포적β-catenin mRNA적표체량무명현차이；Western blot적결과분석현시,TE-1-miR21-세포재접수고제량조사(8Gy,10 Gy)시,β-catenin단백량명현하강；류식세포의분석결과현시,TE-1-miR21-세포중p75NTR+세포적비례교TE-1세포명현강저.결론 하조miR21가이증강식관암TE-1세포적방사민감성；하조miR21증강방사민감성적궤제가능여wnt/β-catenin신호통로적활화정도강저이급식관암TE-1세포중p75NTR+세포비례감소유관.
