实用骨科杂志
實用骨科雜誌
실용골과잡지
JOURNAL OF PRACTICAL ORTHOPEDICS
2012年
12期
1091-1094
,共4页
李霞%徐永清%李福兵%庞荣清%杨杜明%刘华
李霞%徐永清%李福兵%龐榮清%楊杜明%劉華
리하%서영청%리복병%방영청%양두명%류화
骨髓间充质干细胞%显性负性作用%成纤维细胞生长因子受体1%基因表达%小鼠
骨髓間充質榦細胞%顯性負性作用%成纖維細胞生長因子受體1%基因錶達%小鼠
골수간충질간세포%현성부성작용%성섬유세포생장인자수체1%기인표체%소서
目的 探讨含有基因成纤维细胞生长因子受体1显性负性分子(DN FGFRl)的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后的表达及意义.方法 体外分离培养C57/BL小鼠BMSCs,应用综合贴壁的方法纯化BMSCs.由阳离子脂质体介导将pcDNA3.1(+)DNFGFR1转入BMSCs中,用RT PCR法检测DNFGFRl mRNA的表达.结果 小鼠BMSCs原代培养24h后见细胞贴壁伴有伸展现象,细胞核清晰,10d左右细胞密度明显增加,细胞形成单层,融合率达80％,综合贴壁培养使BM-SCs更纯.转染组条带灰度值与β-actin比值(3.8)明显高于未转染组(0.5).结论 pcDNA3.1(+)DNFGFR1质粒能被导入BMSCs并得到表达,为研究FGFR1的功能奠定了实验基础.
目的 探討含有基因成纖維細胞生長因子受體1顯性負性分子(DN FGFRl)的真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1轉染骨髓間充質榦細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)後的錶達及意義.方法 體外分離培養C57/BL小鼠BMSCs,應用綜閤貼壁的方法純化BMSCs.由暘離子脂質體介導將pcDNA3.1(+)DNFGFR1轉入BMSCs中,用RT PCR法檢測DNFGFRl mRNA的錶達.結果 小鼠BMSCs原代培養24h後見細胞貼壁伴有伸展現象,細胞覈清晰,10d左右細胞密度明顯增加,細胞形成單層,融閤率達80％,綜閤貼壁培養使BM-SCs更純.轉染組條帶灰度值與β-actin比值(3.8)明顯高于未轉染組(0.5).結論 pcDNA3.1(+)DNFGFR1質粒能被導入BMSCs併得到錶達,為研究FGFR1的功能奠定瞭實驗基礎.
목적 탐토함유기인성섬유세포생장인자수체1현성부성분자(DN FGFRl)적진핵표체질립pcDNA3.1(+)-DNFGFR1전염골수간충질간세포(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)후적표체급의의.방법 체외분리배양C57/BL소서BMSCs,응용종합첩벽적방법순화BMSCs.유양리자지질체개도장pcDNA3.1(+)DNFGFR1전입BMSCs중,용RT PCR법검측DNFGFRl mRNA적표체.결과 소서BMSCs원대배양24h후견세포첩벽반유신전현상,세포핵청석,10d좌우세포밀도명현증가,세포형성단층,융합솔체80％,종합첩벽배양사BM-SCs경순.전염조조대회도치여β-actin비치(3.8)명현고우미전염조(0.5).결론 pcDNA3.1(+)DNFGFR1질립능피도입BMSCs병득도표체,위연구FGFR1적공능전정료실험기출.
